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微小RNA在直肠癌组织中的表达及其临床意义

2012-07-28伍尚标全天一李志发

中国医药导报 2012年5期
关键词:研究

伍尚标 陈 戎 全天一 李志发

广州医学院第三附属医院胃肠外科,广东 广州 510150

MicroRNA(minRNAs)又称微小 RNA,是一类不具有蛋白质编码功能的单链RNA,一般长度仅为25个核苷酸左右。近年来研究发现,MicroRNA在生物体中参与许多生理病理过程,并发挥着极其重要的作用。其参与的细胞分裂、分化及凋亡活动中与肿瘤的关系最为密切。

直肠癌作为消化道恶性肿瘤极为常见。据统计,近年来我国直肠癌患者明显增多,发病率上升明显,严重威胁人民身心健康。因此,早诊断、早治疗对直肠癌患者的预后改善有着极其重要的意义。

以MicroRNA为主要研究方向的癌症靶向治疗及其肿瘤分子标记技术已经成为世界热点课题,具有很广泛的应用前景,但是MicroRNA在直肠癌诱发机制中的作用研究还处于起步阶段[1-2]。随着实时荧光定量PCR(Real-time PCR)技术的大量应用,为基因在肿瘤调控机制中的作用提供技术支持。

1 资料与方法

1.1 一般资料

我院2009年1月~2011年6月实施手术治疗的直肠癌患者60例,其中,男37例,女23例,患者中位数年龄49岁,标本均通过病例检验为直肠癌。在术中分离直肠肿瘤组织和远离肿瘤组织的正常直肠样本,并即时采用液氮冻存。

1.2 试剂与仪器

RNAiso Plus (TaKaRa), Premix Ex TaqVersion 2.0,(TaKaRa),RNA PCR Kit (AMV)Ver.3.0 (TaKaRa), 伊文蓝(Invitrogen),T4 多核苷酸激酶(Invitrogen),[r-32P]ATP(北京原子能研究所),7500 Fast荧光定量 PCR 仪(ABI)。

1.3 RNA提取

低温环境下使用一次性RNase-free塑料器皿,对上述收集的我院60例直肠癌患者肿瘤组织和远离肿瘤组织的正常直肠样本标本研磨,应用Total RNA提取试剂RNAiso Plus经行总RNA提取。应用紫外分光光度计检测RNA纯度。OD260/OD280(R)值在 1.8~2.0 之间。

1.4 引物……
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