高雪敏，李生泉，樊玮鑫，郝桂青

(山西农业大学分析测试中心，山西 太谷 030801)

脱氧核糖核酸(DNA)是重要的生物大分子，也是遗传信息的载体和基因表达的物质基础。核酸的定量测定可为生物体体液中其它组分的测定及遗传疾病的诊断提供重要信息，因而成为人们关注和研究的重要课题。

目前，测定核酸的常用方法有化学发光法[1～3]、光度分析法[4～6]、荧光分析法[7,8]、共振光散射(RLS)法[9,10]及电化学法[11,12]等。共振光散射法是一种新的光谱分析技术，因其灵敏度高、操作简单，越来越受到分析工作者的重视。金橙G(OG)是一种偶氮类生物染色剂，利用其共振光散射信号测定DNA的方法尚未见报道。基于DNA可以增强OG的共振光散射信号，且在一定范围内其增强值与DNA的浓度呈线性关系，作者建立了一种定量测定DNA的共振光散射法，并用于测定合成样品中DNA的含量。

1 实验

1.1 试剂与仪器

OG储备溶液 (1×10-3mol·L-1)；鲱鱼精DNA(hsDNA，100 μg·mL-1)，4 ℃冰箱保存，使用时稀释。所用试剂均为分析纯，水为二次蒸馏水。

RF-5301型荧光分光光度计，日本岛津；pHS-3C型pH计，上海世义精密仪器有限公司。

1.2 方法

在10 mL 容量瓶中依次加入OG 0.4 mL、一定量的hsDNA标准溶液，用二次蒸馏水稀释至刻度，摇匀，静置 5 min。选择激发狭缝宽度为5 nm、发射狭缝宽度为5 nm，于λem=λex=358 nm处，分别测定样品溶液共振光散射强度I和参照溶液共振光散射强度I0，并根据△I=I-I0计算DNA对OG共振光散射强度的增强值△I。

2 结果与讨论

2.1 共振光散射(RLS)光谱特征

考察了不同激发波长下OG的散射光谱，见图1。

cOG=4×10-5 mol·L-1 1～3.λex=300 nm,350 nm,400 nm

从图1可以看出，OG有较强的共振瑞利散射和微弱的拉曼散射。……