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脱二氧喹烯酮多克隆抗体的制备及其直接竞争ELISA检测方法的建立

2012-07-27傅坚英王延英张吉斌

化学与生物工程 2012年7期
关键词:检测

曹 娟,傅坚英,王延英,张吉斌

(华中农业大学生命科学技术学院 农业微生物学国家重点实验室,湖北 武汉430070)

喹烯酮[1](Quinocetone)是中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所研制的畜禽抗菌、止泻、促生长新药,为我国首创,是喹口恶啉类化合物的一种。喹烯酮除了具有喹口恶啉类药物抗菌、促生长作用的特点外,还具有高效、低毒和添加量少等优点[2]。喹烯酮虽属高效、安全的饲料添加剂,但作为兽药使用时,仍需考虑其通过食物链对人体可能产生的不良影响,所以有必要建立其食用动物组织残留量的检测方法并明确规定其残留限量。

目前,喹烯酮及其代谢物的检测主要集中在喹烯酮原料药及其预混剂和动物组织中的残留。采用的检测方法主要有高效液相色谱法[3]、薄层色谱法[4]和紫外分光光度法[5],这些方法灵敏、准确,但费时费力,成本高,设备昂贵,需要专业人员操作,有一定的局限性。以免疫抗体为基础的免疫检测技术,克服了仪器分析的局限,是一类快速、操作简单的分析方法,在农药、兽药和毒素等小分子物质检测中应用广泛。喹口恶啉类药物中喹乙醇[6]和卡巴氧[7]的毒性较大,免疫分析检测一般集中在这两种药物上,迄今为止,用酶联免疫吸附分析法(ELISA)检测喹烯酮重要代谢标志物脱二氧喹烯酮(DQCT)[8]残留尚未见报道。

作者在此首次利用脱二氧喹烯酮制备人工抗原得到了高效价的多克隆抗体,并用过碘酸钠氧化法制备了辣根过氧化物……

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