天津市南开医院 （天津300100） 杨秀竹 杨 静 刘洪斌

肺炎是常见的呼吸道感染疾病，主要累及支气管、细支气管及肺泡壁，临床以发热、咳嗽为表现。研究表明，缺氧、病原微生物及其毒素联合作用可引起机体血管内皮损伤，炎性介质如内皮素、血管紧张素、前列素A2及组织胺等释放，引起小动脉痉挛、血小板活化导致高凝状态、血黏度异常和微血管血栓形成，最终导致多器官功能衰竭。肺部感染细菌或病毒时均可直接、间接促进促凝物质释放［1］。可以并发微血管血栓，并发播散性血管内凝血（DIC）发生率为5%～37%，在重症肺炎中DIC的发生率为15%［2］。早期肝素治疗能够降低血浆凝血酶原片段1＋2（F1＋2）水平和减少血栓形成。血小板活化的指标包括P－选择素 （CD62p）和血小板膜糖蛋白PAC－1以及细胞内游离钙升高等［3］。血小板活化与肺疾病引起的血栓形成有关。我院于2010年3月至2010年7月诊治慢性阻塞性肺疾病（Chronic obstructive pulmonary disease，COPD）49例和急性肺炎57例，对其全血血小板活化状况进行了测定，并与20例健康对照者进行了对比分析，现分析报告如下。

对象与方法

1 研究对象 49例COPD急性发作和57例急性肺炎患者均为我院呼吸科患者，其中男60例，女46例。年龄54～91岁，中位年龄75.5岁。COPD急性发和急性肺炎的诊断均符合《实用内科学》有关COPD急性发作、急性肺炎的诊断标准［4］。对照组20例为健康自愿者。三组在性别、年龄构成方面经统计学处理无显著性差异（P ＞0.05）。

2 测定方法

2.1 标本采集 于肘窝正中静脉抽取外周血3 ml，取新鲜血2ml轻轻推入专用的CTAD抗凝管，立即送检。

2.2 CD62p和PAC－1检测 用荧光色素标记三种单克隆抗体均购自美国BD公司，与全血中血小板进行直接免疫荧光染色。其中PAC－1FITC，CD62p PE和CD61Percp。RGDS作为PAC－1阻断剂，用于阻断PAC－1的阴性质控。Mouse IgG1PE作为CD62P的同型对照，每个样品做两管，测定管加入3种抗体各20μl，血10μl；对照管加入三种抗体各20μl，血10μl，RGDS 20μl及 mouse IgG1PE20μl。避光15 分 钟，加 入 PBS 750μl，4% 多 聚 甲 醛 250μl，30min后上机。

2.3 流式细胞术（FCM）检测 流式细胞仪采用美国BD公司生产的Calibur型号，用CD61p／SSC设定血小板门，测定10000个细胞。CD61和CD62p或者CD61和PAC－1同时标记者定义为阳性。

3 统计学处理 本组 实验室数据采用SPSS11.5统计软件包进行方差分析，结果以均值±标准差（¯x±s）表示，以P＜0.05为有显著性差异，P＜0.01为有极显著性差异。

结 果

三组患者CD62p和PAC－1表达对比 见附表。COPD急性发作组、急性肺炎组CD62p、PAC－1血小板表面表达无显著性差异（P＞0.05），但两组CD62p、PAC－1血小板表面表达均明显高于健康对照组（P＜0.01）。

附表 各组患者CD62p和PAC－1表达的比较

讨 论

血小板的功能主要是促进止血和加速凝血，血小板在止血和凝血过程中，具有形成血栓，堵塞创口，释放与凝血有关的各种因子等功能。为了明确血小板的活化状态，血小板活化标记物的检测非常重要。CD62p由血小板α－颗粒释放，为钙离子依赖蛋白，占血小板分泌蛋白的25%，血小板活化后，CD62p于血小板质膜上高水平表达，成为血小板的特异性分子标志。PAC－1是血小板活化的早期标志物，即活化的GPⅡb／Ⅲa复合物，它是血小板聚集的最后通路。CD61可以特异性作用于GPⅢa，可以作为血小板的标记物［5］。本资料与文献报道相符，显示CD62p与PAC－1的表达呈正相关，提示其是血小板活化的标记物。因此，血小板活化过程可能激发了血小板释放入循环中。在数目众多的肺泡上，布满了脆弱的毛细血管网，而且肺循环是在低压下维持血流的。因此，肺动脉高压、低氧血症、二氧化碳潴留等病理因素，就容易导致血液高凝状态，甚至微血栓形成。COPD急性发作期及急性肺炎时，发热、缺氧、感染、酸中毒等因素导致血液浓缩，肺血管通透性增加，液体渗出，血流迟缓淤滞，为微血栓形成提供了条件。本组资料显示，血小板表面CD62p和PAC－1表达阳性的比例，在COPD急性发作期和急性肺炎均明显高于正常对照组。而前两者之间差异却不明显，这些结果进一步证实急性肺部炎症患者，无论其是慢性炎症急性发作，还是新近起病皆存在血小板活化现象［6，7］。FCM作为新型的血小板检测技术，操作简便，用血量少，可用于急性肺部炎症病程中血小板活化状态的监测。血小板活化可能成为急性肺部炎症病情及预后评估的一项指标。

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