姬海涛，杨 静

糖尿病及其并发症对靶器官（心、脑、肾等）的损伤，严重威胁着人类的健康和生活质量。良好的血糖控制能够显著减少和延缓糖尿病并发症的发生和发展。长效胰岛素类似物延长了作用时间，无明显峰值，个体内变异小，更好的模拟了正常胰岛素的分泌。胰岛素可以提高前脂肪细胞的分化率，在前脂肪细胞转化中起着相当重要的作用。脂肪细胞的体积增大、数量增多或两者同时存在可引起脂肪组织增加。研究表明，仅少量的体重降低即可能降低糖尿病患者罹患心血管疾病的风险。目前，对胰岛素类似物的对比研究大多以临床研究为主，而基础研究甚少。胰岛素与其类似物对脂肪细胞的影响是否相同呢？本研究采用甘精、地特两种长效胰岛素类似物和人胰岛素分别诱导体外3T3－L1前脂肪细胞分化，检测PPARγ2mRNA表达的变化，探讨胰岛素对PPARγ2mRNA调节的机制。

1 材料与方法

1.1 主要实验用品与化学试剂 DMEM／F12（1∶1）培养基、胰蛋白酶购自Gibco公司；胎牛血清（FCS）购自杭州四季青生物有限公司；青霉素、链霉素购自华北制药股份有限公司；人胰岛素、3－异丁基－1－甲基－黄嘌呤（IBMX）、三碘甲状腺原氨酸（T3）、地塞米松、二甲基亚砜（DMSO）均购自Sigma公司；地特胰岛素由诺和诺德公司提供；甘精胰岛素由甘李药业有限公司提供；细胞培养板购自Corning公司；Trizol试剂购自Invitrogen公司；RT－PCR试剂盒购自Fermentas公司；Fast Start U－niversal SYBR Green Master（ROX）购自Roche公司；引物由上海生工生物工程技术服务公司合成。

1.2 实验方法

1.2.1 3T3－L1前脂肪细胞的培养和诱导分化 将3T3－L1前脂肪……