灯盏花素干预大鼠肝星状细胞 Caspase-3、NF-κ B表达的研究
2012-06-22林明华孟庆媛郭梦凡
林明华,孟庆媛,郭梦凡
(佳木斯大学基础医学院病理教研室,黑龙江 佳木斯 154007)
灯盏花素[1~4](Breviscapine.Bre)系从云贵高原灯盏花全株植物中提取黄酮类有效成分,主要成分是灯盏乙素,具有广泛的生理活性。肝星状细胞[5~7](hepatic stellate cell,HSC)的激活是肝纤维化发生的重要事件及中心环节。核因子 -κB(nuclear factor-κB,N F-κB)可在活化的 HSC中活性增强,且可提高活化 HSC的存活率[8,9],而 Caspase-3是Caspase家族中最重要的成员,有大量研究证明,大多数触发肝细胞凋亡最终均需要通过 Caspase-3介导的信号传导途径导致肝细胞凋亡[10,11]。本文主要研究灯盏花素对大鼠肝星状细胞 Caspase-3、N F-κ B p65表达的干预作用。探讨灯盏花素抗肝纤维化作用的可能机制,为扩大灯盏花素在临床的应用提供理论基础和技术支持,使其更广泛地造福于肝纤维化患者。
1 材料与方法
1.1 实验动物
纯系 Wistar大鼠 60只,雌雄各 半,3月龄,体重 250~300g,由哈尔滨医科大学动物实验中心提供。
1.2 实验药品
Bre片 (广东彼迪药业有限公司);CCl4(广州化学试剂三厂);Caspase-3免疫组化试剂盒、N F-κ B p65免疫组化试剂盒(碧云天生物技术研究所);RT-PCR试剂盒 (上海江莱生物科技有限公司)。
1.3 实验方法
60只 Wistar大鼠用随机数字表分为 6组:正常对照组(NOR)、 Bre高剂量组 (DG)、 Bre中剂量组 (DZ)、 Bre低剂量组 (DD)、模型组 (MOD)、秋水 仙碱组 (COLC)。每组 10只 ,正常对照组腹腔注射生理盐水,饮用清水,其他各组采取 CCl4腹腔注射法诱导大鼠肝纤维化模型,饮用乙醇作为唯一水源。第8周末造模成功后,灯盏花素干预组给予灯盏花素灌胃:浓度 5mg/kg、10mg/kg、20mg/kg;秋水仙碱组 0.lmg/kg剂量灌胃,同时正常对照组与模型组用等量生理盐水灌胃。……
