曾 敏 郝丽娜张晓明 徐 月张 旗 雷正荣

（1.重庆市中医院，重庆 400021；2.山东省安丘市中医院，山东 安丘 262100）

本课题通过纤维结肠镜观察治疗前后结直肠息肉临床变化及免疫组化S-P法检测结直肠息肉中P53蛋白的表达，探讨济生乌梅片治疗息肉的效果及抑瘤作用。为进一步开发成治疗结直肠息肉的新药提供临床和理论依据。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选取2008年2月至2010年4月在笔者所在医院肛肠科门诊或住院部患者中选择60例，满足西医或中医诊断标准任一类；病历资料齐全；年龄18～65岁；签署试验知情同意书者。其中男性42例，女性18例；年龄23～58岁，平均年龄42.80岁。息肉直径＜2 cm；息肉枚数不超过5枚者；经病理检查组织无癌变者。病理类型包含炎性息肉，增生性息肉及腺瘤样息肉3种，部分息肉腺上皮轻、中度不典型增生。60例患者按随机数字表法分为治疗组、手术组、对照组，各组临床资料差异无统计学意义（P＜0.05）。

1.2 主要试剂 鼠抗人P53单克隆抗体、枸橼酸抗原修复液（pH6.0）、抗体稀释液、S-p免疫组化试剂盒、浓缩型DAB试剂盒、PBS均购自福州迈新生物技术开发公司

1.3 方 法

1.3.1 治疗方法 治疗组口服院内制剂济生乌梅片（每片0.3g），每日3次，每次3片；手术组采取内镜下息肉摘除；对照组口服安慰剂，用法同治疗组。服药以1个月为1疗程。每组治疗前均记录息肉枚数及直径，息肉周围黏膜炎症情况并摄片供随访对比，取病理组织活检及P53蛋白检查；3个疗程后观察疗效。

1.3.2 免疫组化 采用S-P法检测P53蛋白表达，每次试验均设阳性及阴性对照，阳性对照片选择已知结肠癌P53表达阳性的组织，阴性对照加入PBS代替一抗。具体操作按照S-P试剂盒说明书进行。

1.4 疗效标准 观察息肉治疗前后大小，周围黏膜有无炎症改变；其中规定息肉在治疗后缩小都作为治疗有效指标。P53蛋白阳性着色位于细胞核，少数病例在胞浆呈弥漫性染色，以细胞核内出现棕黄色颗粒为判断标准。阳性：≥10%阳性细胞。阴性：＜10%阳性细胞或不着色。

1.5 统计学处理 应用SAS6.12统计软件。计数资料采用χ2检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 各组治疗前后息肉周围黏膜炎症情况比较 见表1。经纤维结肠镜观察，在治疗前，各组间炎症情况基本一致；在治疗后，与对照组比较，治疗组与手术组炎症控制良好，差异有统计学意义（P＜0.05）。

表1 各组在治疗前后息肉周围黏膜炎症比较（n）

2.2 各组治疗后息肉变化情况比较 见表2。与对照组比较，治疗组与手术组疗效较好（P＜0.05）。

2.3 P53蛋白在治疗前后息肉组织中的表达 见表3。手术组因手术切除仅3例复发未纳入统计。治疗前，治疗组与对照组相比，两组间P53蛋白在息肉组织中表达的阳性率无显著差异；治疗后，治疗组的P53蛋白的阳性率显著性较对照组低 （P＜0.05）。

表2 治疗后各实验组息肉改变情况（n）

表3 P53在治疗前后息肉组织中的表达n（%）

3 讨 论

济生乌梅片为笔者所在医院院内制剂。由乌梅、僵蚕、莪术、红花等组成。药理研究证明，乌梅有抗微生物、抗突变、抗肿瘤等作用［1］。诸药合用，可奏消积散结、化瘀行血之效。

P53基因由11个外显子和10个内含子构成，定位于人类17号染色体短臂17P13.1上，全长20kb，编码相对分子质量为53×103的核内磷酸化蛋白。有野生型和突变型之分，自然存在的野生型P53基因是一种重要的抑癌基因，主要生物学功能为引起细胞周期阻滞，诱导凋亡和促进分化［2］。由于其含量少、半衰期短而不能用免疫组化方法检测出。若P53发生基因突变成为突变型P53，则诱导细胞凋亡功能被抑制，细胞增殖失控，结果致癌发生［3］。由于其半衰期延长，且在核内积聚，通过免疫组化的方法可以直接检测。因此，当组织中有P53蛋白的高表达，即表明有P53基因的突变［4］。大量资料表明，P53基因突变、缺失是许多肿瘤发生的原因［5］。因而P53基因检测对肿瘤的早期诊断及筛检有重要意义。

本实验在治疗后，治疗组及手术组与对照组比较息肉周围黏膜炎症状况明显减轻，息肉脱落并缩小与对照组比较有显著差异，P53蛋白在济生乌梅片组表达降低，与对照组比较差异有显著的统计学意义。因此，本实验中治疗组对结直肠息肉组织有软坚、散结、化息肉之功用。济生乌梅片组息肉组织中p53蛋白下降，提示济生乌梅的抑癌作用是通过抑制癌基因的表达而实现的。

［1］南京中医药大学.中药大辞典［M］.上海：上海科学技术出版社，2006：659，1378，2507，3695.

［2］Yoo N J，Kim H S，Kim S Y，et al.Imm unohist och emical an alysis of smac/DIABLO expressi on in human carcinomas and sarcomas［J］.APM IS，2003，111（3）：382-388.

［3］Kohl i M，Yu J，Seaman C，et al.SMAC/Diabl o-dependent apoptosis in duced bynon steroidal ant iinfl ammatory drugs （NSAIDs） in colon cancer cells［J］.PNAS，2004，101（48）：16897-16902.

［4］Endo K，Kohnoe S，Wat anabe A，et al.Clinical significance of Smac/DIABLOexpressionincolorectalcancer［J］.JOncolRep，2009，21（2）：351-355.

［5］王保平，朱耀明，朱晨宇，等.结直肠癌组织中smac的表达及意义［J］.山东医药，2008，48（3）：45-46.