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舒郁散对慢性应激抑郁大鼠行为及海马BDNF表达的影响*

2012-06-13陈利平王发渭孙志高黄泉智柯清林

中国中医急症 2012年7期
关键词:海马剂量实验

陈利平 王发渭 孙志高 黄泉智 柯清林

(1.解放军总医院海南分院,海南 三亚 572004;2.解放军总医院学员队,北京 100853)

舒郁散具有抗抑郁作用,可调节大脑神经递质、神经肽以及海马5-HT受体表达而发挥抗抑郁作用[1-2]。本研究选用慢性不可预见的应激抑郁模型,观察舒郁散对模型大鼠行为的影响,以及对海马脑源性神经营养因子(BDNF)蛋白表达的影响,以期为抑郁症的临床治疗提供实验依据。

1 材料与方法

1.1 动物及分组 60只Wistar大鼠,体质量180~220 g,解放军总医院医学实验动物中心提供,动物号为SCXK-京-2009-0007。大鼠先用Open-Field法作行为学评分[3],选择得分相近的50只大鼠随机分为正常对照组、模型组、百忧解组(20 mg/次)、舒郁散小剂量组(含生药0.5 g/mL)、舒郁散大剂量组(含生药5.0 g/mL),每组10只。正常对照组每笼饲养5只,其他组每笼饲养1只。

1.2 药物与试剂 舒郁散处方由中国人民解放军总医院中医科提供,由柴胡、枣仁、郁金、栀子等组成,上药浸泡、煎煮,过滤,于80℃恒温水浴中浓缩成含生药量5 g/mL药液,存冰箱备用,使用时蒸馏水稀释灌胃;百忧解胶囊,礼来苏州制药有限公司分装,批准文号:国药准字2006017。BDNF(批号:909083W)北京博奥森生物技术有限公司产品。二抗显色试剂盒为En Vision Detection Kit基因科技 (上海)有限公司产品(Code No:GK500705)。全自动真空脱水机(LEICAASP300)、组织包埋机(LEICAEG1140H)、石蜡切片机(LEICARM2135)、展片机(LEIC-AHI1210)均为德国LEICA公司产品。光学显微镜为日本OLYMPUSBX60显微镜。APES防脱玻片、PBS缓冲液、柠檬酸盐缓冲盐、3%H2O2为北京中杉金桥生物技术有限公司产品。

1.3 模型制备 对大鼠进行21 d应激刺激,包括:摇晃5 min,禁水 24 h、禁食 24 h、夹尾 1 min,电击足底(每次 10 s,间隔1 min),冰水游泳 5 min,噪音刺激、转换昼夜节律 24 h,制动,热刺激40℃ 5 min。……

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