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黄芪建中汤对脾气虚肺癌小鼠免疫功能及cyclin D1基因表达的影响*

2012-06-14包素珍张爱琴孙在典李恒楠

中国中医急症 2012年7期
关键词:小鼠剂量血清

包素珍 张爱琴 孙在典 宋 红 李恒楠

(1.浙江中医药大学,浙江 杭州 310053;2.浙江省肿瘤医院,浙江 杭州 310022;3.浙江省中医院,浙江 杭州 310006)

现代研究发现黄芪建中汤可减轻放化疗后的毒副反应,有明显的抗氧化作用,抑制组织中表皮生长因子及表皮生长因子受体的过度表达进而抑制肿瘤的发生[1]。cyclin D1为目前公认的癌基因,其过度表达时使细胞周期G1/S期转换时间缩短,导致细胞增殖失控,从而发生癌变。为进一步明确黄芪建中汤对免疫功能的影响及抑制肿瘤发生的作用机制,本实验通过建立脾气虚Lewis肺癌模型,研究黄芪建中汤对脾气虚肺癌小鼠免疫功能及cyclin D1基因表达的影响。

1 材料与方法

1.1 动物与瘤株 C57BL/6小鼠60只,雌性,体质量(20±2)g,购于上海医学科学院实验动物中心。饲养于浙江中医药大学实验动物中心清洁级动物房。小鼠Lewis肺癌瘤株,购于上海医学科学院实验动物中心。

1.2 药物 黄芪建中汤由芍药18 g,桂枝9 g,炙甘草6 g,生姜9 g,大枣4枚,饴糖30 g,黄芪9 g组成。药材购自浙江中医药大学门诊部中药房,按《中药药理研究方法学》计算小鼠低、中、高剂量的等效剂量分别为:8.1、16.2、32.4 g/kg体质量,分别为成人剂量的6、12、24倍,按常规方法煎成汤剂,配制成生药含量分别为 0.324、0.648、1.296 g/mL 的药液。

1.3 试剂及仪器 D-木糖试剂盒,南京建成生物工程研究所;胃泌素放免试剂盒,北京北方生物技术研究所;白细胞介素(IL)-2 ELISAKIT试剂盒,上海晶美生物工程有限公司;cyclin D1引物,上海生工生物工程技术服务有限公司;TGL-16B台式高速离心机,上海安亭科学仪器厂;UV2000紫外分光光度计,美国UNICO公司;……

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