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脂联素受体在正常SD大鼠乳鼠心肌细胞的分布和表达1)

2012-06-13柴颖儒肖传实边云飞

中西医结合心脑血管病杂志 2012年6期
关键词:实验

王 敏,柴颖儒,肖传实,卫 娜,边云飞

脂联素(adiponectin,APN)是由脂肪组织分泌的一种激素,在体内代谢平衡中发挥着重要的作用,多项研究显示脂联素有抗炎、抗动脉硬化、抗胰岛素抵抗的作用。近年研究发现,脂联素参与了缺血/再灌注损伤的心肌保护[1],而脂联素的此种保护作用需要与其特异受体相结合而发挥作用,经典的脂联素受体(AdipoR)分为AdipoR1和AdipoR2,AdipoR1在骨骼肌中高度表达,AdipoR2在肝脏中高度表达[2]。近年发现T-钙黏蛋白(T-cadherin)是脂联素的又一新受体[3],而在心肌细胞上,这三种脂联素受体是否均表达且表达量如何,目前文献报道较少。本研究采用体外培养乳鼠心肌细胞,研究心肌细胞上脂联素受体的表达情况,为脂联素对心肌受损后的保护作用提供理论支持和依据。

1 材料与方法

1.1 实验动物 健康SD大鼠乳鼠,1d~3d龄,雌雄不限,由山西医科大学实验动物中心提供。

1.2 主要试剂和仪器 DMEM培养基(Gibco公司);胎牛血清(杭州四季青公司);Ⅱ型胶原酶、胰蛋白酶、4%多聚甲醛、Triton X-100(Solarbio,Spain);PCR引物(上海生物工程技术有限公司);兔抗鼠α-肌动蛋白一抗及FITC羊抗兔二抗(北京博奥森生物技术有限公司);兔抗大鼠AdipoR1一抗、兔抗大鼠AdipoR2一抗、兔抗大鼠T-cadherin一抗(Santa Cruz公司,美国);即用型SABC试剂盒(武汉博士德生物工程有限公司),其余试剂均为国产分析纯产品。HERA cell 150细胞培养箱、Mini-Sub Cell GT、Bio-Rad水平电泳系列、Ge Doc、Bio-Rad凝胶成像系统、Nikon TS100倒置显微镜、OlympusIX50荧光倒置显微镜,由山西医科大学第二医院干细胞研究中心提供。

1.3 方法

1.3.1 乳鼠心室肌细胞的培养及鉴定 经动物管理委员会同意,选用……

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