宋衍秋，赵莉莉，毛用敏*，赵鸿铭，徐美林，崔让庄

（天津市胸科医院1.天津市心血管病研究所;2.病理科，天津 300050）

重组腺病毒Ad-hBNP的构建及其在CHF大鼠中的分布与表达

宋衍秋1，赵莉莉1，毛用敏1*，赵鸿铭1，徐美林2，崔让庄1

（天津市胸科医院1.天津市心血管病研究所;2.病理科，天津 300050）

目的 构建重组腺病毒Ad-hBNP，观察其在CHF大鼠体内的分布与表达，为腺病毒介导BNP治疗慢性心力衰竭奠定实验基础。方法 RT-PCR法从人心肌组织获得hBNP片段，应用AdEasy腺病毒载体系统，构建Ad-hBNP;CHF成模大鼠24只，随机分为4组，18只单次腹腔注射Ad-hBNP后，均分为1、4和7 d组;余不予Ad-hBNP，为0点组。实验动物于相应时间处死，ELISA检测血清hBNP水平，免疫组化检测各脏器hBNP表达，RT-PCR检测各组织hBNPmRNA表达。结果 成功构建用于实验性基因治疗的Ad-hBNP，纯化后滴度达到4.4×1012VP/mL。透射电镜观察Ad-hBNP呈多面体结构，颗粒直径在90 nm左右。单次腹腔注射Ad-hBNP，CHF大鼠心脏、肝脏、肺脏、肾脏、脾脏及小肠均检测到hBNP表达，外源hBNP在CHF大鼠体内的表达至少可持续7天。结论 腺病毒介导的外源hBNP基因可在CHF大鼠多脏器中得到有效表达，其生物学效应时间显著长于BNP的生物半衰期。

B型利钠肽;腺病毒;慢性心力衰竭;基因治疗

*通信作者（corresponding author）:yongminmao@163.com

B型利钠肽 （B-type natriuretic peptide，BNP）是由左室肌细胞合成和分泌的一种肽类激素，其主要生理作用是:排尿利钠，参与水盐代谢;扩张血管，降低周围血管阻力;抑制肾素-血管紧张素-醛固酮系统;降低交感神经系统兴奋性;抗内皮细胞、平滑肌细胞、心肌细胞的有丝分裂，并抑制其增殖等［1］。慢性心力衰竭 （Chronic heart failure，CHF）是一种复杂的临床综合征，是多种心脏结构或功能疾病损伤心室充盈和 （或）射血能力的结果。……