谷丽娟，侯建明，甄艳军，李爱英

（河北医科大学基础课教学部，河北石家庄 050091）

偏硅酸钠抑制家兔外周血白细胞活性氧的生成

谷丽娟，侯建明*，甄艳军，李爱英

（河北医科大学基础课教学部，河北石家庄 050091）

*通信作者（corresponding author）:jckbsh@126.com

高血脂时外周血白细胞引爆和激活，产生过多活性氧（reactive oxygen species，ROS），抑制过量的ROS产生对于控制动脉粥样硬化（atherosclerosis，AS）发生发展具有重要意义［1］。以往研究发现偏硅酸钠（Na2SiO3）有抗炎效应［2］。本实验观察Na2SiO3对家兔外周血白细胞ROS的抑制作用，为Na2SiO3抗AS机制提供进一步资料。

1 材料与方法

1.1 动物:清洁级新西兰家兔（河北医科大学动物中心，合格证号:1004218），雄性，体质量1 500～2 000 g。

1.2 制备ox-LDL:从健康家兔耳中动脉取血，沉淀法提取低密度脂蛋白，置硫酸铜（CuSO4）溶液中37℃氧化24 h得氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）。

1.3 分离白细胞:兔淋巴细胞分离液分离健康家兔血细胞，取出单个核细胞层和中性粒细胞层混合，得到白细胞悬液。

1.4 白细胞内ROS的测定:采用DCFH-DA探针测定ROS。

1.5 体外ox-LDL刺激白细胞分组:分离的兔外周血白细胞分成6组。1）正常对照组;2）ox-LDL组:ox-LDL终浓度50 mg/L;3）68.5组、4）34.2组、5）17.1组和6）8.5组:培养液中加ox-LDL（50 mg/L）并Na2SiO3，硅的终浓度分别68.5、34.2、17.1和8.5 mg/L。以无血清DMEM悬浮细胞，总体积1 mL（含细胞3×106个），37℃摇动孵育3 h，装载 DCFH-DA探针，洗涤细胞2次后测荧光值（3 h荧光值）。然后恢复ox-LDL和 Na2SiO3浓度，继续孵育30 min后再次测荧光值（3 h+30 min荧光值）。

1.6 动物实验分组:12只家兔分为3组。1）正常组:普通饲料喂养;2）高脂组:高脂饲料;3）Na2SiO3组:与高脂组同步饲喂高脂饲料3周，第4周按每日2 mg硅/kg的量给予Na2SiO3溶液100 mL为饮用水，仍然高脂饲料喂养。共计4周后分离外周血白细胞。每只家兔……