陈 秋，韩圣娜，张 雨，段彦彦，张莉蓉

（郑州大学基础医学院药理学教研室，河南郑州 450001）

地高辛抑制豚鼠心室肌细胞Na+，K+-ATP酶和人胚肾上皮细胞系HERG钾通道电流

陈 秋，韩圣娜，张 雨，段彦彦，张莉蓉*

（郑州大学基础医学院药理学教研室，河南郑州 450001）

*通信作者（corresponding author）:lrzhang@zzu.edu.cn

强心苷类药对Na+，K+-ATP酶的作用在低浓度时为兴奋、在高浓度时呈抑制作用［1］。应用膜片钳技术观察地高辛（Digoxin）对豚鼠心室肌细胞Na+，K+-ATP酶电流（Ip）的作用还未见报道。此外，由于很多药物的心脏不良反应是通过抑制人ether-a-go-go-related基因（HERG）编码的快速激活的延迟整流钾通道（IKr）而引起QT间期延长和尖端扭转性室速（TdP）［2］。本研究初步探讨地高辛对豚鼠心室肌细胞Ip电流和对人胚肾上皮细胞系（human embryonic kidney cell line，HEK-293）上HERG/IKr钾通道的影响及地高辛治疗心功能不全和引起心脏毒性反应的机制。

1 材料与方法

1.1 动物、细胞系、质粒来源及地高辛配制:普通级豚鼠，8～12周龄，体质量250～300 g，雌雄不拘，由华中科技大学同济医学院实验动物学部提供［合格证号SCXK（鄂）2004-007］。HEK-293细胞，中国科学院上海生科院细胞资源中心。编码IKr的HERG基因的真核细胞表达载体pcgi-EGFPHERG（南京师范大学生命科学院张朝教授馈赠）。地高辛（郑州大学药学院药物化学研究所提供）溶于二甲基亚砜中配制成10 mmol/L的母液。

1.2 单个豚鼠心室肌细胞的急性分离:通过酶解获得横纹清楚、边缘光滑及耐钙的单个豚鼠心室肌细胞，室温下保存备用。

1.3 细胞培养、磷酸钙瞬时转染及加药:HEK-293细胞在含10%胎牛血清的高糖DMEM培养液中，放置于37℃，5%CO2的细胞培养箱中培养。采用磷酸钙转染方法［3］，将HERG-cDNA导入HEK-293细胞。……