贾焕珍，鲁玲玲，龚普盛，付越姣，赵春礼，段春礼，杨 慧

（首都医科大学神经生物学系北京神经科学研究所北京市神经再生修复研究重点实验室神经变性病教育部重点实验室，北京 100069）

PINK1参与调节多巴胺的合成

贾焕珍，鲁玲玲，龚普盛，付越姣，赵春礼，段春礼，杨 慧*

（首都医科大学神经生物学系北京神经科学研究所北京市神经再生修复研究重点实验室神经变性病教育部重点实验室，北京 100069）

目的 探讨PINK1基因对多巴胺合成的调节作用。方法 用高压液相色（HPLC）电化学方法检测多巴胺（DA）含量，用Western blots和Real-Time PCR法检测DA合成限速酶酪氨酸羟化酶（TH）和多巴脱羧酶（DDC）的表达量，通过免疫共沉淀（Co-IP）和免疫组织化学染色观察PINK1和TH之间是否存在相互作用。结果PINK1基因敲减后，细胞内DA水平为5.356±0.536 μg/L，显著低于对照组的11.630±1.559 μg/L（P＜0.05）;TH mRNA和蛋白的表达分别为0.371±0.140和0.195±0.062，显著低于对照组的1.009±0.152和0.386±0.044（P＜0.05）;DDCmRNA和蛋白的表达分别为0.396±0.124和0.149±0.029，显著低于对照组的1.100±0.070和0.323±0.037（P＜0.05）;免疫荧光化学检测PINK1和TH存在共定位，Co-IP显示PINK1和TH存在相互作用。结论PINK1可以通过调控DA的合成酶TH和DDC的表达影响DA的合成。

PINK1;RNA干扰;酪氨酸羟化酶;MN9D细胞

帕金森病（Parkinson's Disease PD）是常见的中枢神经系统退行性病变，主要病理变化是中脑黑质致密部多巴胺能神经元的选择性变性和丢失，纹状体多巴胺（dopamine，DA）含量降低，进而引起运动功能障碍［1］。PINK1是已知与 PD相关的致病基因［2］，PINK1突变可以引起遗传性 PD［3］，而且有研究表明PINK1与散发性PD亦有密切关系［4］。因此，研究PINK1的功能，对于理解PD的发生有重要意义。

在果蝇模型中，PINK1突变可以引起部分脑区酪氨酸羟化酶（Tyrosine Hydroxylase，TH）阳性神经元的减少，以及DA含量的减少［5－6］。……