田世成，黎满香，蒋 伟，林荣高，郭洪香，屈泰龙

（湖南农业大学动物医学院，湖南长沙 410128）

粪肠球菌是栖居于人类或动物胃肠道的正常菌群，也可定植于口腔和阴道，且广泛分布于自然界中。它们能获得特定的基因决定簇，比如毒力因子和耐药性决定簇，使其适应各种生态系的能力增强［1］。目前，对粪肠球菌的种群结构和全球流行病学了解还是非常有限［2］，特别是对动物来源菌株。在兽医临床中近年来不断有动物感染的报道［3－4］，且肠球菌属在兽医临床标本中的分离率也不断增加。目前，对肠球菌的鉴定仍依靠传统表型特征的检测作为重要的鉴定方法。但由于许多肠球菌种间的表型特征非常接近，因此鉴定起来费时费力，以至错失治疗时机，使病情得不到及时的控制。不少的分子生物学技术已经被应用于粪肠球菌的流行病学分析［5］，扩 增 片 段 长 度 多 态 性 （amplified fragment length polymorphism，AFLP）方法可以用来获得细菌基因型信息［6］。采用AFLP技术在链霉菌菌种鉴定上也是一种方便有效的工具［7］。本试验以从不同发病猪场分离出的42个分离株为研究对象，在表型鉴定符合粪肠球菌的基础上，进行了AFLP及系统进化分析研究，旨在对该菌进行分类分型，用以追溯传染源，了解湖南省猪场粪肠球菌引起感染的情况及主要基因类群的分布差异。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 菌株 试验所用菌株包括标准菌株ATCC29212，临床分离株42株，主要从病猪肺、脾、脑、淋巴结等处分离。其中长沙分离8株、永州7株、娄底5株、郴州4株、岳阳3株、益阳3株、邵阳3株、怀化2株、衡阳1株、株洲1株，还有5株不能确定到市级地区。……