(承德医学院附属医院，河北承德067000)

垂体肿瘤转化基因(PTTG1)是从垂体瘤组织中分离出的原癌基因，研究证明其高表达在促进细胞增殖转化以及体内肿瘤形成方面具有重要作用。2010年5月～2011年12月，我们观察了喉鳞癌组织中的PTTG1蛋白及其mRNA的表达变化，并探讨其临床意义。

1 材料与方法

1.1 标本来源 喉鳞癌组织以及癌旁组织(距离肿瘤切缘至少＞0.5 cm)取自手术治疗的62例原发喉鳞癌患者，术前均未接受放、化疗。标本获得后分为2份，一份立即冻存于－80℃液氮中，另一份标本经10%甲醛固定、石蜡包埋、4μm厚度连续切片。所有标本均经过病理学检查确诊。

1.2 方法

1.2.1 PTTG1蛋白检测方法 取石蜡切片，采用免疫组化SP法检测，按说明书操作。以PBS代替一抗作为阳性对照，以已知喉癌阳性组织切片为阳性对照。PTTG1阳性细胞为细胞质出现棕黄色颗粒。在染色均匀的肿瘤区域选取5个高倍镜视野(×200)，计算阳性细胞百分率＜25%为1分，25% ～50%为2分，＞50%为3分;不着色为0分，浅棕黄色为1分，棕黄色为2分，棕褐色为3分。二者得分相加＞1分判为阳性表达。

1.2.2 PTTG1 mRNA检测方法 采用RT-PCR法，按说明书操作。Trizol法抽提总RNA，氯仿及异丙醇纯化，加无 Rnase水20μL溶解，测 OD值定总RNA量。将反应产物在1%琼脂糖凝胶上电泳，经EB染色后，在紫外荧光数字成像仪下照像，并进行光密度半定量分析。以每例PTTG1与相应β-actin扩增产物条带累积光密度(IOD)的比值作为PTTG1 mRNA的相对表达量。

1.2.3 统计学方法 采用SPSS13.0统计软件。数据比较用χ2检验、t检验。P≤0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 喉鳞癌及其癌旁组织中PTTG1蛋白及mRNA表达情况 在62例喉鳞癌组织中，PTTG1蛋白阳性表达率及其mRNA表达量分别为67.74%、0.74±0.134，显著高于癌旁组织中的 23.08%、0.47 ±0.10(P 均 ＜0.01)。……