刘馨莲，殷 舞

(1成都医学院病理学教研室，成都610083;2广西壮族自治区人民医院)

微小染色体维持蛋白(MCMs)是一组与DNA复制和细胞增生密切相关的蛋白家族［1］，其能与复制子结合，使DNA复制成为可能，是DNA复制启动和延伸的必需因子之一，属于一种与DNA复制有关的解链酶［2］。细胞增殖核抗原(Ki-67)是目前公认的评价细胞增殖状态的指标，其在病理诊断中应用最为广泛。2005年9月～2009年9月，我们观察了前列腺癌组织中MCM5和Ki-67的表达，旨在进一步探讨前列腺癌的发生机制。

1 材料与方法

1.1 材料 选择广西壮族自治区人民医院病理科前列腺癌组织标本50份(肿瘤组)，患者年龄52～86(73±8.4)岁，均经病理检查确诊，其中高分化12例、中分化15例、低分化23例;Jewett分期为A期8例、B期16例、C期17例、D期9例。另选取15份良性前列腺增生组织作为对照(增生组)。两组患者一般资料无统计学差异。主要试剂:MCM5单克隆抗体(NeomakersFremont公司)，鼠抗人Ki-67单克隆抗体与S-P试剂盒(北京中杉生物技术开发公司)，DAB试剂盒(福州迈新生物技术开发公司)。

1.2 MCM5和Ki-67表达检测 标本均经10%甲醛固定，普通石蜡包埋，4μm连续切片。采用免疫组化SP法检测MCM5和Ki-67表达:DAB显色。石蜡切片脱蜡水化后，微波抗原修复，过氧化酶阻断剂灭活内源性过氧化物酶活性，羊血清工作液封闭，滴加一抗4℃过夜，滴加生物素标记的二抗，滴加链亲和素—过氧化物酶溶液。DAB显色，苏木精复染。用已知宫颈鳞状细胞癌组织切片为阳性对照，用PBS代替一抗作为阴性对照。结果判断标准:MCM5和Ki-67的阳性信号均定位于细胞核，呈棕黄色颗粒。……