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水泡性口炎病毒双抗体夹心ELISA检测方法的建立

2012-05-21孙秀萍宋晗星苏高莉包英夫宋德光

中国预防兽医学报 2012年8期
关键词:检测方法

孙秀萍,宋晗星,苏高莉,周 平,何 叶,王 丽,潘 伟,丁 宁,包英夫,孙 晨,宋德光

(1.吉林大学畜牧兽医学院,吉林 长春 130062;2.吉林大学白求恩医学院,吉林 长春 130021)

水泡性口炎病毒(Vesicular stomatitis virus,VSV)属于弹状病毒科水泡病毒属的成员,为具有囊膜的单股负链RNA病毒。水泡性口炎是由VSV引起的一种高度接触性传染病,主要以在感染动物的口腔、舌、唇、乳头和蹄冠部上皮等部位皮肤/黏膜发生水泡为特征[1]。VSV以节肢动物为传播媒介,可以感染啮齿类动物及牛、猪、马等多种动物[2]。人也可以偶尔感染VSV,引起类似急性流感样的症状[3]。其临床症状与口蹄疫(FMD)、猪水泡病(SVD)等极为相似,在兽医临床上容易被误诊。近年来,该病也有在我国自然发生的报道[4],给畜牧业造成严重的经济损失。

目前,常见的VSV检测方法主要有病毒分离鉴定、血清中和试验[5]、补体结合试验和RT-PCR[6-7]等方法,但这些检测方法大多成本较高,并且需要一些特殊仪器设备,不适合基层现场检验工作的需要。因此,研制一种操作简单、使用方便快捷的VSV检测方法对于现地应用十分必要。本研究在前期VSV单克隆抗体(MAb)制备的基础上,采用纯化的抗原制备了兔抗VSV多克隆抗体,通过对捕获抗体和检测抗体的筛选,建立了一种简便、快速、特异的VSV双抗体夹心ELISA检测方法,为VSV的血清学快速检测和流行病学调查提供技术保障。

1 材料和方法

1.1 病毒与细胞株 水泡性口炎病毒(VSV-IND)、猪水泡病病毒(SVDV)、猪水疱疹病毒(VESV)、羊传染性脓疱病毒(ORFV/JL/08/CC)、BHK-21细胞、VSV MAb杂交瘤细胞株1A2(识别VSV结构蛋白的G蛋白)由吉林大学畜牧兽医学院病理实验室保存。……

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