斜链拟青霉胞外多糖对免疫抑制小鼠免疫功能的影响
2012-05-11高云星
杨 成,高云星,董 群
(皖南医学院 医学微生物学与免疫学教研室,安徽 芜湖 241002)
斜链拟青霉(Paecilomyces cateniobliquus),一种重要的虫生真菌,多寄生于茶卷叶蛾、茶小卷叶蛾,与细脚拟青霉、蝉拟青霉、冬虫夏草的无性型中国拟青霉同属拟青霉属真菌。细脚拟青霉、蝉拟青霉、冬虫夏草对机体免疫功均具有很强的调节活性[1-4],而目前,斜链拟青霉的研究和应用多集中在生物防治[5],有关其药理活性方面的研究报道尚少[5]。本实验拟就斜链拟青霉胞外多糖对环磷酰胺(cyclophosphamide,CP)致免疫力抑制的小鼠模型进行免疫调节实验,研究胞外多糖对免疫抑制小鼠免疫功能的影响。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 菌株和来源 斜链拟青霉(Paecilomyces cateniobliquus)由安徽农业大学省微生物防治重点实验室提供。
1.1.2 培养基 蛋白胨10 g/L,葡萄糖40 g/L,酵母浸出粉10 g/L,蒸馏水1 000 ml。
1.1.3 药品和试剂 环磷酰胺(购自江苏恒瑞医药股份有限公司,批号:07011421),LPS(购自Sigma公司),小鼠IL-12检测试剂盒(购自南京建成生物工程研究所,批号:080612),RPMI1640完全培养液(购自GIBCO),其他均为国产分析纯。
1.1.4 实验动物 昆明系小鼠30只,(18~22)g,雌雄各半,由南京医科大学实验动物中心提供,合格证号:Scxk(苏)2008-0010。
1.2 方法
1.2.1 斜链拟青霉胞外多糖制备 采用上述SDAY液体培养基,以10%的接种量接入一级液体种子,置28℃真菌培养箱静置培养25 d后抽滤,取滤液低温减压浓缩至原体积的1/4,加无水乙醇4℃冰箱过夜进行分级醇沉,终浓度梯度为30%→50%→75%,离心,取沉淀冻干后备用。
1.2.2 实验动物分组及处理 参考文献[7-8],实验动物适应环境一周后随机分组,6只小鼠作为正常组,剩余24只小……
