受体骨髓源性内皮祖细胞(EPC)对小鼠移植性动脉硬化的影响
2012-05-08杨兆华朱仕杰夏利民王春生
杨兆华 洪 涛 朱仕杰 夏利民 王春生
(复旦大学附属中山医院心外科 上海 200032)
移植性动脉硬化是器官移植术后主要的远期并发症之一,常导致移植器官功能丧失而影响受体长期存活。当前,移植性动脉硬化的发病机制仍不明确,临床上也缺乏行之有效的治疗方法。内皮祖细胞(endothelial progenitor cell,EPC)由于具有潜在的血管损伤修复功能并在多种心血管疾病发病过程中发挥重要作用,正越来越受到研究者的重视[1-2]。近年来的多项研究证实,EPC同样参与移植性动脉硬化的发病过程[3-4]。本课题组在前期的研究中发现:移植性动脉硬化发病与外周血中EPC的数量明显减少密切相关[5]。但是,通过增加EPC数量是否可以减轻移植动脉内膜增生从而防治移植性动脉硬化,目前尚未见文献报道。因此,本实验取受体同品系小鼠骨髓单个核细胞(mononuclear cell,MNC)经体外诱导培养EPC,并输入小鼠移植性动脉硬化模型体内,旨在观察EPC对移植动脉内膜损伤修复及内膜增生的影响,进一步探讨移植性动脉硬化可能的发病机制。
材料和方法
实验动物 C57BL/6小鼠及BALB/c小鼠,雄性,体重20~25g,由复旦大学实验动物科学部提供。
实验试剂及器材 M199培养液、胎牛血清、胰蛋白酶(美国Gibco公司);小鼠淋巴细胞分离液(Ficoll液,Histopaque-1083,美国Sigma公司);人纤维连接蛋白(natural human fibronectin,美国Biosource/Invitrogen公司);重组小鼠血管内皮生长 因 子-165(vascular endothelial growth factor-165,VEGF-165,美国 Peprotech公司);DiI标记的乙酰化低密度脂蛋白(DiI-ac-LDL,美国 Molecular Probe公司);FITC标记的荆豆凝集素 (FITCUEA-1,德国Vector公司);兔抗小鼠vWf单克隆抗体、兔抗小鼠Flk-1单克隆抗体以及免疫荧光通用SABC试剂盒(武汉博士德公司);……
