MDA-MB-231细胞源exosome对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)VEGF自分泌及体外成管作用的影响
2012-05-07隆霜沈宜谢莹珊范维珂姜蓉陈黎
隆霜 沈宜 谢莹珊 范维珂 姜蓉 陈黎
(重庆医科大学基础医学院病理生理学教研室干细胞与组织工程研究室 重庆 400016)
细胞间的相互作用在肿瘤发生发展、促血管生成及侵袭转移中起到重要作用。肿瘤微环境作为保护和支持肿瘤发生发展及转移复发的必要功能单元的理论已被广大学者接受。内皮细胞作为肿瘤微环境的重要组成部分,是肿瘤血管生成的基础。肿瘤细胞分泌大量促血管生成因子,促使内皮细胞的激活、迁移,并最终形成血管腔,不仅为原发肿瘤生长所必需,也是肿瘤细胞向远处转移的必备条件[1]。相对于已知的细胞通讯方式,目前一种起源于细胞内吞途径中的多泡体(multivesicular body,MVB)的膜性小囊泡exosome在细胞信息传递中的作用日渐受到重视[2]。
exosome是一种源于细胞内吞途径中的多泡体,由后者与细胞膜融合后释放到胞外的小囊泡体。新近研究表明[3-4],exosome携带有大量蛋白质、mRNA和microRNA,并能将其选择性地递送至受体细胞,从而在细胞间发挥多种生物学作用。本研究将人乳腺癌MDA-MB-231细胞源exosome与人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)进行体外共培养,初步探讨乳腺癌MDA-MB-231细胞源exosome对血管内皮细胞VEGF表达及其对VEGF/VEGFR2自分泌环的作用。
材料和方法
材料人乳腺癌细胞株MDA-MB-231和HUVEC细胞株由重庆医科大学干细胞与组织工程研究室提供,复苏后使用。RPMI-1640培养基、DMEM高糖、新生牛血清购自Gibco公司,重水购自青岛腾龙微波科技有限公司,分析纯蔗糖购自上海生工生物有限公司,BCA蛋白定量试剂盒、预染蛋白……
