李玉强万忠林

（1河南省平顶山市第一人民医院，河南 平顶山467000；2平高集团有限公司医院）

我院产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌的耐药性分析

李玉强1万忠林2

（1河南省平顶山市第一人民医院，河南 平顶山467000；2平高集团有限公司医院）

目的：了解我院产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）大肠埃希菌（ECO）的耐药现状，为临床合理用药提供依据。方法：将1999年1月-2011年9月我院分离ECO的药敏试验结果，应用WHONET 5.5软件进行统计学分析；产ESBLs菌株采用双纸片协同实验测定并经美国临床实验室标准化协会确证试验确认。结果：ECO和产ESBLs ECO的分离率为21.6%和63.9%。产ESBLs菌株的耐药率远高于非产ESBLs菌株。产ESBLs ECO除对亚胺培南、阿米卡星、呋喃妥因和头孢哌酮钠舒巴坦钠敏感率较高外，对其他抗菌药物耐药严重。结论：我院应重视对产ESBLs菌株的监控，临床应合理应用抗菌药物；碳青霉烯类是治疗产ESBLs ECO最有效的药物。

大肠埃希菌；超广谱β-内酰胺酶；耐药性

大肠埃希菌（Escherichia coli，ECO）是临床感染中最常见的致病菌。近年来ECO中产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）菌株所占的比例越来越高[1]，且产ESBLs ECO耐药严重，由其导致的各类感染临床治疗困难[2]。为了解ECO的耐药现状，指导临床有效控制ECO感染，对我院1999-2011年分离的ECO进行了回顾性分析。

1 资料与方法

1.1 菌株来源

1999年1月 -2011年 9月我院微生物实验室从各种送检标本中培养分离的2 746株ECO，剔除重复菌株。

1.2 细菌鉴定和药敏试验

细菌培养按 《全国临床检验操作规程》（第3版）进行；细菌鉴定采用API（Analytic Products INC，API）鉴定系统（购自法国生物梅里埃公司）；药敏试验采用纸片琼脂扩散法（K-B法），纸片购自北京天坛药物生物技术开发公司；结果按美国临床实验室标准化协会 （Clinical and Laboratory Standards Institute，CLSI）标准判定。质控菌株为大肠埃希菌ATCC25922，购自河南省临床检验中心。

1.3 ESBLs检测

将鉴定后的ECO常规做双纸片协同试验并经CLSI确证试验确认。确证试验如下：分别使用头孢他啶（30 μg）、头孢噻肟（30 μg）纸片和头孢他啶 /克拉维酸（30 μg/10 μg）、头孢噻肟 /克拉维酸（30 μg/10 μg）的复合剂纸片进行试验，当任何一种复合剂纸片抑菌圈直径大于或等于其单独药敏纸片抑菌圈直径5 mm，可确证该菌株产ESBLs。

1.4 数据分析

数据采用WHONET 5.5软件进行统计学分析，耐药率间的比较采用χ2检验。

2 结果

2.1 分离率

13年中共分离出12 727株病原菌，其中ECO的分离率为21.6%（2 746株），临床分离率有下降趋势。ECO中产ESBLs菌株的检出率为63.9%（1 755株），临床分离率有升高趋势。见表 1。

表1 1999-2011年ECO及产ESBLsECO的分离率（n=2746）

2.2 分布特征

菌株的来源按标本分为：痰 （28.2%），尿液（24.6%），脓液（17.8%），胸腹水（8.9%），分泌物（8.5%），血液（7.2%），其他（4.8%）；按科室分：呼吸内科（19.7%），ICU（15.6%），血液肿瘤科（11.6%），肾内科（9.4%），泌尿外科（8.9%），普外科（8.2%），内分泌科（5.9%），老年病科（4.2%），妇产科（3.9%），神经内科（3.1%），其他（9.5%）。

2.3 耐药性

ECO在13年中耐药率以第三、四代头孢菌素类药物升高明显。产ESBLs菌株比非产ESBLs菌株的耐药率显著增高。见表2、3。

表21999-2011 年ECO中产ESBLs菌株的耐药率(%)

3 讨论

ESBLs是ECO等细菌产生的一种丝氨酸蛋白酶衍生物，可破坏含β-内酰胺结构的药物，使其降解失效，为ECO产生耐药的主要方式之一。目前将ESBLs分为TEM、SHV、OXA、CTX-M及其他型5类。我国以CTX-M为主，其可通过质粒在细菌间传播，且ESBLs编码质粒上可以携带氨基糖苷类、氟喹诺酮类等抗菌药物的耐药基因，导致多重耐药[1]。外排泵为ECO耐药的另一重要机制[3]。

从表1可以看出，13年中ECO在致病菌中的分离率呈下降趋势，由1999年的41.7%降至2011年的18.9%，但仍高于全国平均10.0%的水平[4]。但产ESBLs菌株从ECO中的分离率上升趋势明显，已从1999年的26.4%升至2011年的79.8%，远高于全国平均35.3%的水平[5]。出现这种现象的原因可能与地区差异有关。

从表2和表3可以看出，ECO中产ESBLs菌株对大多数抗菌药物耐药率较高，产ESBLs菌株比非产ESBLs菌株的耐药率高得多，除亚胺培南和呋喃妥因外两者之间存在显著性差异 （P＜0.05）。尤以第三、四代头孢菌素类药物差异明显，所有第三、四代头孢类抗菌药物对产ESBLs菌株完全耐药，而对非产ESBLs菌株的耐药率在6.5%以下。鉴于目前ECO中产ESBLs菌株的分离率高达79.8%，不含酶抑制剂的青霉素类及第三、四代头孢菌素类抗菌药物用于ECO经验性治疗常无效，因此，一旦明确产ESBLs菌株感染，应立即给予有效药物治疗，必要时可首选亚胺培南[6]。目前对产ESBLs ECO较为有效的抗菌药物有亚胺培南、阿米卡星、哌拉西林钠三唑巴坦钠和头孢哌酮钠舒巴坦钠。

表31999-2011 年ECO中非产ESBLs菌株的耐药率(%)

我院严格按照《抗菌药物临床应用指导原则》的要求认真落实，强化围手术期抗菌药物的管理，认真执行抗菌药物分级管理，定期督导、检查和评比抗菌药物使用情况，促进临床合理应用抗菌药物。控制药品收入占医院总收入的40%以下。抗菌药物管理取得了明显的成效。2004年之前抗菌药物耐药率上升势头较快，2005-2006年上升势头已减缓，2007年以后有所下降。我院细菌耐药性的变迁与杨玉霞等[7]报道的一致。在控制细菌耐药方面瑞典的经验很值得我们借鉴[8]。

高龄、免疫力低下、长期住院患者是产ESBLs ECO易感对象，应用糖皮质激素、化疗、介入治疗是产ESBLs ECO感染的高危因素。因此，对产ESBLs ECO感染重在预防，加强无菌观念、严格消毒隔离防范措施、减少侵入性操作、合理应用抗菌药物，是预防和减少产ESBLs细菌感染和传播的有效措施。

[1] 罗燕萍，张秀菊，徐雅萍，等.产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌的分布及其耐药性研究[J].中华医院感染学杂志，2006，16（1）：101-104.

[2] 肖永红.细菌耐药：挑战与对策[J].中国执业药师，2011，8（6）：3-8.

[3] 翁幸鐾，糜祖煌.大肠埃希菌尿液分离株7种抗菌制剂外排泵基因研究[J].中华医院感染学杂志，2010，20（6）：759-762.

[4] 文细毛，任南，吴安华，等.全国医院感染监控网医院感染病原菌分布及变化趋势[J].中华医院感染学杂志，2011，21（2）：350-355.

[5] 肖永红，王进，赵彩云，等.2006-2007年Mohnarin细菌耐药监测[J].中华医院感染学杂志，2008，18（8）：1051-1056.

[6] 罗燕萍，李琴春，叶丽艳，等.104株大肠埃希菌对3种氟喹诺酮类药物突变抑制浓度的比较研究[J].中华医院感染学杂志，2009，19（17）：2242-2244.

[7] 杨玉霞，栾斌，马丽娜.2000-2010年下呼吸道感染病原菌构成变迁及耐药性分析[J].中华医院感染学杂志，2011，21（16）：3509-3511.

[8] 肖永红.瑞典控制细菌耐药战略项目介绍[J].中国执业药师，2011，8（6）：42-44.

Analysis of Drug Resistance of Extended Spectrum Beta-Lactamases Producing Escherichia Coli in Hospital

Li Yuqiang1，Wan Zhonglin2(1 The First People’s Hospital of Pingdingshan,Henan Pingdingshan 467000, China;2 Hospital of Pinggao Group Co.Ltd.)

Escherichia coli；Extended Spectrum Beta-lactamases；Drug Resistance

10.3969/j.issn.1672-5433.2012.03.002

2011-11-19）

李玉强，男，副主任药师。研究方向：医院药学、临床药学。E-mail：lyqmyl@163.com

ABSTRACTObjective：To investigate the current situation of drug resistance of extended spectrum beta-lactamases (ESBLs)producing Escherichia coli(ECO)in our hospital with the aim of providing reference for clinical rational drug use in our hospital.Methods：The data of drug susceptibility tested during 1999 to 2011 in our hospital were analyzed by WHONET 5.5 software.ESBLs producing strains were tested by the double disk test and confirmed by CLSI confirmatory test.Results：The isolated ratios of ECO and ESBLs producing ECO were 21.6%and 63.9%respectively during 1999-2011.The resistance rates of ESBLs producing strains were much higher than those of non-ESBLs producing strains.ESBLs producing ECO was sensitive to imipenem,amikacin,nitrofurantoin,cefoperazone sodium and sulbactam sodium but presented high resistance to the other antibiotics.Conclusion：Attention should be paid by our hospital to monitor the ESBLs producing strains.Antibiotics should be used rationally in clinics.Carbopenem was proved as the most effective antibiotics to treat the infection caused by ESBLs producing strains.