黄连温胆汤对糖尿病小鼠海马神经凋亡的影响
2012-04-23张卫华张维新刘华东石富国陈志明
张卫华 ,张维新,刘华东,石富国,陈志明 ,刘 舟
(1.南京中医药大学,江苏南京210046;2.宁夏中卫市人民医院,宁夏中卫755000;3.中国药科大学,江苏南京211198)
糖尿病脑病是近几年受到研究者重视的糖尿病慢性中枢神经系统并发症,表现为痴呆样的学习和记忆功能障碍[1]。尽管糖尿病脑病的发病机制目前还没有完全明确,但研究表明,神经细胞的变性、凋亡导致中枢神经细胞的数目减少是发生认知功能障碍的重要病理基础[2]。黄连温胆汤出自清代陆廷珍《六因条辨》,由黄连、半夏、陈皮、茯苓、枳实、竹茹、炙甘草、生姜组成,具有清化痰热之功,可用于治疗痰热内扰所致的糖尿病并发症[3],但应用于糖尿病脑病却少见报道。本研究通过黄连温胆汤干预治疗2型糖尿病小鼠后,原位末端标记法(TUNEL法)检测海马神经元的凋亡,免疫组织化学法检测caspase-3蛋白的表达,以期探讨黄连温胆汤对2型糖尿病小鼠海马神经凋亡的影响。
1 材料与方法
1.1 实验材料
1.1.3 仪器与设备 酶标仪(Thermo,美国);电子天平(北京赛多利斯天平有限公司);大容量低温离心机(KUBOTA,日本);96孔培养板(Costar,美国)。
1.2 实验方法
1.2.1 造模与给药 小鼠按体重随机分为空白组(10只)和造模组,分别喂养普通饲料和高糖高脂饲料。喂养4 w后,造模组小鼠腹腔注射STZ 100 mg/kg,保证所有注射在15 min内完成。注射72 h后,禁食不禁水12 h,采用葡萄糖氧化酶法测量小鼠空腹血糖,空腹血糖值>11 mmol/L者为2型糖尿病小鼠,去除血糖值不达标小鼠,按照血糖值随机分为二甲双胍组(0.25 g/kg)、模型组、黄连温胆汤低剂量组(5 g/kg)、中剂量组(10 g/kg)和高剂量组(20 g/kg),每组 10只。造……
