平喘宁对哮喘大鼠肺组织cAMP/cGMP及TGF-β1mRNA表达的影响
2012-06-22方向明袁亚美王丽娜
方向明,袁亚美,王丽娜,胡 谦
(安徽中医学院,安徽 合肥 230038)
平喘宁为治疗临床寒性哮喘的有效方剂,由射干麻黄汤和三子养亲汤化裁而成,功效温肺化痰、止咳平喘、息风止痉,治疗寒哮。第二信使cAMP、cGMP可能是阴阳学说的物质基础之一,多篇文献报道cGMP含量升高、cAMP/cGMP比值降低是阳虚证的特征,是判断肺阳虚模型复制成功的指标。TGF-β是已知最强的致纤维化因子之一[1],其功能的发挥主要取决于TGF-β1。肺组织中的TGF-β1基因表达强度与胶原的含量成明显正相关[2],并作为TGF家族的多效细胞因子,在气道高反应性(AHR)与气道急性炎症反应中发挥抑制性作用。但在气道受到抗原的反复刺激造成慢性炎症时,气道中的TGF-β1持续性增高,进而引起或促进气道重建和肺组织纤维化[3-4]。该实验通过平喘宁干预寒性哮喘大鼠模型,采用逆转录-聚合酶链式反应(RTPCR),检测哮喘大鼠肺脏的TGF-β1mRNA表达水平,研究该药治疗寒性哮喘的分子生物学效应机制。
1 材料与方法
1.1 实验材料
1.1.1 实验动物 8月龄健康雄性Wistar大鼠70只,体重200 g~220 g,普通级,安徽医科大学动物实验中心,许可证号:SCXK(皖)2011-002。
1.1.2 药物与试剂 平喘宁方药组成:麻黄、杏仁、苏子、半夏等,饮片来源:安徽中医学院国医堂制剂中心,分别煎制成3级浓度生药,浓度分别为4.2 g/mL(大剂量)、2.1 g/mL(中剂量)、1.05 g/mL(小剂量)。地塞米松片:上海信谊药业有限公司产品(批号:030402);桂龙咳喘宁:山西桂龙医药有限公司(批号:Z20053135)。卵蛋白(OVA)(美国Sigma公司,批号:A8040),3%戊巴比妥钠(德国Merok公司,批号:20070923),SP免疫组化染色试剂盒(中山生物技术有限公……
