张均克

（江汉大学医学院，湖北 武汉 430056）

傅氏生化汤的祛瘀生新功用已被临床医生习用，我们将该方作为一种血管新生诱导剂，在大鼠缺血后肢模型中观察到其促血管新生效应［1］。血管新生是从内皮细胞（endothelial cell，EC）受到刺激而增殖游走开始的，其EC来源于既存的微血管内皮细胞［2］。在正常成人，EC和血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cell，VSMC）不进行有丝分裂，但在生长发育、缺血缺氧、炎症及其他应激情况下，可以发生游走和分裂，从而启动血管新生的一系列过程［3］。而在血管内皮细胞的标志中，CD34的特异性最高，优于内皮细胞的其他标记物［4］。因此本研究采用免疫组化SABC法检测大鼠骨骼肌组织中血管内皮细胞CD34的表达水平，用以显示和计数微血管密度，更好地观察评价傅氏生化汤促血管新生效应。

1 材料与方法

1.1 实验材料

1.1.1 实验动物 Ⅰ级雄性Wistar大鼠50只，体重约200 g～250 g，购自华中科技大学同济医学院实验动物学部。

1.1.2 试剂与仪器 羊抗兔SABC试剂盒（即用型）、DAB显色试剂盒、兔抗大鼠CD34单克隆抗体均购自武汉博士德生物工程有限公司。主要实验仪器有恒冷箱切片机（LEICA CM1900-Cryostat），CS101-2AB电热干燥箱，隔水式电热恒温培养箱及冰箱等。

1.1.3 实验药物 实验用中药材全部购自武汉市药材公司，经专业人员鉴定。为使该方的研究结果更能切合于现代临床，故将当归、川芎、桃仁、黑姜、炙甘草，按 6∶2∶1.5∶0.5∶0.5的比例，加水浸泡，按常规煎煮2次，每次1 h，合并滤液浓缩至适量，加95%酒精，使含醇量达65%，静置24 h后，过滤，滤液回收乙醇至尽。加蒸馏水定容使成100%浓度，滤过，灌装，压盖，灭菌备用，此即生化汤口服液（以下简称SHT）。……