李 萍，冯世军，朱文胜，艾东方，杨秀芳

(1沧州市中心医院，河北沧州061001;2青县人民医院)

尖锐湿疣(CA)是由人乳头瘤病毒(HPV)感染所致的一种性传播疾病，少部分可以癌变。由于其发病部位及顽固性常给患者带来巨大的心理压力和治疗费用增加，因此进一步研究其致病机理尤为重要。CA是角质形成细胞过度增殖为主要组织病理学表现的良性病变，已证实多个信号通路与之相关，MAPK途径及 STAT途径研究较多，但 Hedgehog (Hh)信号通路与 CA的关系国内外鲜有报道。2009年5月～2010年12月我们通过检测Patched-1 (Ptch-1)和Gli-1在CA皮损中的表达，探讨Hh信号通路与CA的关系，为CA的发病机理提供某些理论基础。

1 资料与方法

1.1 临床资料 CA患者组织标本均来自沧州市中心医院皮肤科门诊，每例均经过临床及组织病理确诊，且所有患者取材前未做过治疗，共58例，其中男32例、女26例，年龄18～62岁、平均28.2岁，病程3 d～9个月。正常对照组来源于我院整形美容科手术切下的正常人健康皮肤，均无任何系统性疾病及皮肤疾病，共15例，其中男6例、女9例，年龄

17～51岁、平均30.8岁。

1.2 主要试剂 Ptch-1和Gli-1抗体均为美国SantaCruz公司产品，两种抗体工作浓度皆为1∶200。免疫组化试剂盒及DAB显色试剂盒均购自北京中杉生物技术有限公司。

1.3 实验方法 切取的皮损及正常组织均常规给予10%甲醛固定石蜡包埋，切成4 μm厚的切片，石蜡切片脱蜡至水，3%H2O2消除内源性过氧化酶活性，高压锅抗原修复，滴加正常兔血清封闭液，室温孵育10 min，加入一抗(Ptch-1和Gli-1抗体)工作液，37℃孵育2 h，滴加生物素标记二抗、37℃孵育10～30 min，滴加链霉亲和素-过氧化物酶复合物，37℃孵育10～30 min，DAB显色，自来水充分冲洗，苏木素复染，乙醇脱水，中性树脂封片。……