顾金萍 陶俊 范建霞

（上海交通大学附属国际和平妇幼保健院，上海 200030）

多囊卵巢综合征（polycystic ovarian syndrome，PCOS）是女性最常见的内分泌与生殖功能障碍性疾病，育龄妇女PCOS的患病率约为10%［1］。PCOS病因复杂，可能受遗传和环境因素共同影响。肥胖相关基因（fat mass and obesity associated gene，FTO）与PCOS发病具有非常密切的关系［2］。在基因组变异中，单核苷酸多态性（single nucleotide polymophism，SNP）是一种主要形式。已有研究［3］显示PCOS人群FTO基因的SNP与其发病存在关联。本研究探讨PCOS患者的子代是否也具有上述FTO杂合性变异。

1 资料与方法

1.1 一般资料 2009年6月—2011年4月在上海交通大学附属国际和平妇幼保健院定期产检并分娩的孕妇55例，其中28例PCOS治疗后孕妇为研究组（PCOS组）（诊断标准严格遵照2003年鹿特丹标准）；另27例为年龄、体质量指数（body mass index，BMI）与研究组匹配的健康产妇为对照组。研究组平均年龄（28.63±2.39）岁，对照组平均年龄（28.87±3.18）岁，两组平均年龄无显著差异（P＝0.78）。PCOS组孕前平均BMI（23.79±3.42）kg／m2，对照组孕前平均BMI（24.06±3.45）kg／m2，两组孕前平均BMI无显著差异（P＝0.776）。

1.2 实验方法

1.2.1 胎盘组织 DNA抽提 （1）将200μL胎盘组织中加入400μL细胞裂解液混匀，再加入6μL蛋白酶K混匀，置于55℃水浴20min，期间混匀几次；（2）加入600μL氯仿后充分混匀；（3）12 000r／min，室温离心2min。离心管内液体呈3层，基因组DNA在上层中，取上层清液500μL，置于无菌1.5mL离心管中；（4）加入500μL沉淀液后混匀，室温放置2min后以12 000r／min，离心2min；（5）弃上清，立即加入100μL的1.2mol／L氯化钠溶液，轻轻振荡直至DNA样品完全溶解，加入2μL RNA酶，置于37℃10min；（6）加入300μL冰冷乙醇，－20℃放置10min后以12 000r／min，离心5～8min，离心后吸走或倒掉乙醇，用70%乙醇洗1次，倒置室温干燥10min。然后加入100μL TE溶解DNA。

1.2.2 引物设计及PCR引物设计见表1，扩增成功的PCR产物采用2%浓度的琼脂糖凝胶电泳检测，在凝胶电泳成像分析仪上观察结果；……