徐晓武，杨小敏，金洲祥，许 远，朱少俊

华蟾素诱导人乳腺癌细胞株MCF-7细胞凋亡与Bax/Bcl-2的关系

徐晓武1，杨小敏2，金洲祥1，许 远1，朱少俊1

目的：观察华蟾素在诱导人乳腺癌MCF-7细胞株凋亡的过程中Bax和Bcl-2蛋白表达的变化及意义。方法：在人乳腺癌细胞株MCF-7中分别加入不同终浓度的华蟾素，24 h、48 h及72 h后检测指标。应用MTT比色法检测细胞增殖活力，倒置显微镜观察细胞形态学变化，TUNEL法检测细胞凋亡指数，Western blot法检测Bax/Bcl-2蛋白表达，共聚焦显微镜观察Bax蛋白分布。结果：华蟾素能显著抑制MCF-7细胞增殖；倒置显微镜下发现凋亡的MCF-7细胞固缩、核染色质凝聚；western blot发现华蟾素能上调MCF-7细胞Bax蛋白表达，但对Bcl-2蛋白表达无影响，正常MCF-7细胞内的Bax均匀分布于细胞质中，华蟾素处理后，Bax明显地聚集于线粒体，呈现线粒体的转位。结论：华蟾素诱导MCF-7细胞凋亡，并在该过程中导致的Bax蛋白表达上调并且向线粒体转位。

华蟾素注射液；人乳腺癌细胞株MCF-7；凋亡；Bax；Bcl-2

中药诱导肿瘤细胞凋亡是重要的抗肿瘤机制之一。华蟾素注射液是我国传统药材中华大蟾蜍阴干全皮加工制成的水溶性注射剂，主要成分是蟾毒灵及吲哚生物碱等，具有清热解毒、利水消肿、化瘀溃坚等作用[1]。本研究观察了华蟾素对体外培养的MCF-7细胞凋亡与Bax/Bcl-2蛋白表达的关系，并探讨了华蟾素抗肿瘤的分子机制。

1 材料与方法

1.1 材 料 华蟾素注射液（安徽金蟾生化股份有限公司，每支5 mL，批号041003）。兔抗Bax单克隆抗体、兔抗Bcl-2单克隆抗体、兔抗β-actin单克隆抗体、聚偏二氟乙烯（PVDF）膜（北京中杉金桥生物工程有限公司）。……