谭佩毅 黄秀锦

（江苏食品职业技术学院，江苏 淮安 223003）

免疫卵黄抗体球蛋白（yolk immunoglobulin，IgY），又称鸡卵黄抗体，是卵黄中存在的唯一一种免疫球蛋白［1］。它是在特异性抗原刺激作用下由禽类B淋巴细胞产生并转移至卵黄中的多克隆抗体。以其性质稳定、制备简单、成本低、产量大、抗体活性高而备受关注［2］。尽管从卵黄中提取IgY 有诸多优点，但在工业和商业上的应用却并不广泛，产量仅占多克隆抗体总产量的2%左右［3］，主要原因在于很难将其从富含脂质的卵黄中分离出来［4］。

将IgY 从卵黄中分离出来一般包括分离、提取和纯化3个步骤。分离的关键是如何去除蛋黄中高含量的脂类物质［5］，目前主要的分离方法包括水稀释法、有机物沉淀法、有机溶剂抽提法、天然胶法、中链脂肪酸法、去污剂分离法、超临界气体提取法等［6］。其中水稀释法工艺比较简单，抗体回收率较高，是目前应用较广泛的分离方法［7］。水稀释法是利用相似相溶原理将水溶性组分溶于水中，而不溶于水的脂蛋白则以沉淀的形式分离出来，加盐酸调整pH，可以将不溶性组分完全分离开来。IgY 的提取是将IgY 从水溶性成分中分离出来，得到卵黄抗体，主要用到的沉淀剂有硫酸铵、硫酸钠、PEG（聚乙二醇）和乙醇等。其中乙醇提取需要－20℃冷冻，硫酸钠溶解度小，受温度的影响大，PEG 和硫酸铵两种方法都比较快速、简便［8］。

本试验以水稀释法为基础，结合PEG6000沉淀法对卵黄中IgY 进行分离提取，探讨了稀释倍数、溶液pH 值、静置时间、PEG6000浓度等因素对IgY 提取率的影响，并通过正交试验对分离提取条件进行了优化，旨在获得最佳分离条件，为大量制备抗大肠杆菌免疫卵黄抗体奠定技术基础。……