王 玲 尚云青 匡 钰 王阿敏

（1.广东海洋大学食品科技学院，广东 湛江 524088；2.云南中医学院，云南 昆明 650500）

细胞固定化的方法目前有吸附法、交联法和包埋法［1］。吸附法是利用载体和细胞表面所带电荷的静电引力，使细胞吸附于载体上，该法条件温和、方法简便、载体可再生，但操作稳定性差；交联法是利用双功能或多功能试剂与细胞表面的反应基团（如氨基、羧基、羟基、巯基、咪唑基）反应，从而使细胞固定，此法可得到较高的细胞浓度，但机械强度低，无法再生，实际生产应用不多；包埋法是在无菌条件下，将生物细胞和凝胶溶液混合在一起，然后再经过相应的处理，形成直径为1～4mm 的胶粒，此法制得的固定化细胞和载体间没有束缚，固定化后，细胞仍保持较高活力。目前生产上常采用的是包埋法。

海藻酸盐是一种广泛应用的固定化介质，具有化学稳定性好、无毒、包埋效率高且价格低廉等优点［2］。本试验以海藻酸钠为载体，以丝瓜瓤为支持物制备固定化菠萝果酒酵母菌，通过单因素试验和正交试验，对酵母菌的固定化条件进行研究；并将制备好的菠萝果酒固定化酵母菌应用于菠萝果酒发酵过程中，比较固定化酵母与游离酵母的酒精发酵能力。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

1.1.1 材料

菠萝：购于湛江农贸市场；

酵母菌：菠萝果酒酵母菌，本实验室自行分离；

YPD 液体培养基（酵母浸出粉胨葡萄糖培养基，用于酵母菌的繁殖）：蛋白胨2%，酵母浸膏1%，葡萄糖2%（制备YPD 固体培养基时再加2%的琼脂）；……