罗 程 郑宝石何 巍 冯 旭 雷宾峰 彭 俊

(广西医科大学第一附属医院心胸外科，南宁市 530021)

同种带瓣动脉具有抗血栓、抗感染及良好的血流动力学，广泛应用于治疗先天性心脏病及瓣膜病，但移植后钙化衰败成为影响其疗效的主要问题［1］。临床上经常会遇到年轻患者同种瓣膜植入后发生早期的衰败［1，2］，这种结构性衰败可能是相关的免疫基础。我们采用白兔同种带瓣动脉颈动脉异位移植模型，对移植后不同时间段的免疫指标和钙含量进行检测，以探讨环孢素预处理后同种瓣移植免疫排斥与钙含量的改变及其意义。

1 材料和方法

1.1 实验动物模型的建立 实验动物采用4周龄的白兔50只作为供体，体重0.30～0.35 kg。将8周的白兔50只，体重3.00～3.50 kg，随机分成2组作为受体，25只接受环孢素预处理Hank's液+抗生素+CsA 30 mg/L保存为实验组，另外25只Hank's液+抗生素保存为对照组。

1.2 方法

1.2.1 试剂配制

1.2.1.1 环孢素配置液 环保素注射液(山地明) 5 ml/250 mg，用0.9%生理盐水稀释浓度为1 mg/mL。

1.2.1.2 工作液配制 1号工作液:参考王荣平等［3］的低浓度抗生素液配方，改良型Hank's液250 mL，分别加入先锋霉素V(50 mg/L)、庆大霉素(5 000 U/L)、大蒜素(50.0 mg/L)，NaOH滴定至pH值在7.2～7.4之间。2号工作液:改良型RPMI-1640培养基，10%小牛血清，10%体积分数二甲基亚砜8∶1∶1［4］。0.22 μm滤膜分别正压过滤除菌，4℃冰箱保存。

1.2.2 血管处理 肌注麻醉后，常规消毒，直接开胸，于主动脉弓部分支前剪断［5］，筛选瓣叶和血管壁内膜光滑、无粥样硬化斑和钙化斑，瓣叶功能良好者为合格［6］。冲洗血管后置入1号工作液，4℃冰箱灭菌24 h。改良型Hank's液灭菌处理后随机分为对照组、实验组。……