王春晖 钱福初

(1.湖州市八里店镇卫生服务中心,浙江 湖州 313000;2.湖州市中心医院,浙江 湖州 313000)

乙型肝炎血清学标志物是诊断乙肝病毒感染的常规免疫学检测方法,但在日常检验工作中往往会遇到一些异常的血清学模式,如HBsAg和HBsAb同时阳性,HBsAg阴性但 HBeAg阳性,仅 HBeAb强阳性,仅HBcAb强阳性等。本实验应用荧光定量PCR方法对这些患者血清HBV进行检测,了解乙肝血清标志物少见模式患者乙肝病毒载量状况。

1 资料与方法

1.1 一般资料 2009年10月～2011年5月在湖州市吴兴区八里店镇卫生服务中心就诊患者及湖州市中心医院就诊患者检测乙肝血清标志物样本中收集的少见模式血清标本270例(其中吴兴区八里店镇卫生服务中心35例,湖州市中心医院235例)诊断标准均符合2005年中华医学会肝病学分会和感染病学分会联合制定的《慢性乙型肝炎防治指南》[1],包括 HBsAg和 HBsAb同时阳性97例,男60例,女 37例,年龄 9～78岁,平均(42.6±15.8)岁;HBsAg阴性但 HBeAg阳性 8例,男 7例,女 1例,年龄22～68岁,平均(48.2±15.5)岁;仅 HBeAb强阳性60例,男 36例,女 24例,年龄 18～76岁,平均(53.2±14.5)岁;仅 HBcAb强阳性105例,男 60例,女45例,年龄19～81岁,平均(59.2±13.4)岁。血清标本储存于-80℃备用。

1.2 主要试剂和仪器 ELISA检测试剂盒购自上海科华生物科技有限公司;HBV荧光定量PCR试剂盒购自深圳匹基生物工程股份有限公司;荧光定量PCR分析仪为Roche公司Light Cycler实时定量PCR仪。

1.3 血清乙肝标志物检测 采用ELISA方法检测乙肝血清标志物,按照试剂操作说明书进行。检测HBsAg、HBsAb、HBeAg时当样本OD值 S/CO ≥1.0,判断为阳性;检测HBeAg、HBcAb时当样本OD值S/CO≤1.0,判断为阳性。

1.4 HBV-DNA定量检测 采用HBV-DNA荧光定量PCR试剂盒检测血清标本HBV载量,反应在Light Cycler实时定量PCR仪上完成,严格按照标准操作规程进行。……