李 翀，卓先勤

(1三亚市人民医院重症医学科，海南三亚572000;2琼州学院理工学院，海南三亚572022)

0 引言

光动力疗法(photodynamic therapy，PDT)对肿瘤杀伤作用的基础研究，近年来引起人们的高度重视.Survivin是近年新发现的一种肿瘤特异性凋亡抑制蛋白(inhibitor of apoptosis protein，IAP)，具有抑制凋亡效应蛋白酶caspase活性、参与细胞周期调控及调节细胞有丝分裂等多种生物学作用，与肿瘤的发生发展密切相关［1］.

在假定新能量状态下光敏剂为有重大潜力光敏剂的基础上，探讨了新能量状态下光敏剂产生单线态氧的能力及其产生的单线态氧对肿瘤细胞的杀伤能力，旨在为新能量状态下光敏剂光敏剂的开发提供理论基础.

1 材料与方法

1.1 新能量状态下光敏剂

以文献［2，3］的方法制备溶于5%二氯甲烷的甲醇溶液成1mg/ml新能量状态下光敏剂储液.

1.2 NADPH磷酸盐重水缓冲液的配制［4］

将样品配成2 mg/ml的二甲基亚砜溶液.称取0.626gNa2HPO2·12H2O和0.0314gKH2PO4溶于适量水中，使总体积为100ml，即得pH7.4－7.8的0.01 mol/L磷酸盐缓冲液.称取33.25 mg还原型辅酶Ⅱ钠盐加入上述磷酸盐重水缓冲液，即为0.4 mmol/L NADPH磷酸盐重水缓冲液.

1.3 新能量状态下光敏剂在重水中对NADPH氧化作用的光动力敏化效应

将新能量状态下光敏剂与适量NADPH磷酸盐缓冲液混匀，使样品浓度分别为1、2、3、4、5μmol/L，光源由高压汞灯加滤光片(800 nm)获得，然后在紫外分光光度计上于波长340 nm测定辐照后样品溶液中NADPH残留量.用同样照光的不含NADPH而含等量同浓度样品的磷酸盐缓冲液作空白，以照光的不含样品而含等量水的NADPH缓冲液作对照，测定各个样品于不同浓度下……