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鼠尾胶原蛋白提取、分离、纯化方法的建立及鉴定

2012-02-03任海涛钟志勇郑佳琳饶子亮邝少松唐小江

中国比较医学杂志 2012年11期
关键词:方法

任海涛,钟志勇,郑佳琳,饶子亮,邝少松,王 刚,唐小江

(广东省医学实验动物中心,佛山 528248)

鼠尾胶原蛋白是胶原蛋白的一种,主要为Ⅰ型胶原蛋白[1]。Ⅰ型胶原蛋白主要存在于真皮、腱、骨、牙本质,以纤维形式形成胶原,由三股缠绕形成多肽链组[2]。作为一种新型生物材料,鼠尾胶原蛋白并不为众人所知,但是其具有的诸多优势,如低抗原性、生物可降解性、优越的生物相容性并有利于细胞贴附和迁移等特点[3],为细胞增殖和功能分化提供了合适的微环境[4-5],且它来源广泛,成分单一,制备比较方便,是开发具有相关功能性生物医疗器械的好材料[6]。

目前,国内外对胶原蛋白提取、分离、纯化主要有中性盐法[7]、酸提取法[8-9]、碱提取法[6-10]、酶法[11-12]等,但中性盐法、酸提取法、碱提取法方法均存在着提取得率低,且操作复杂,还可能破坏胶原蛋白的三维立体结构[13]。酶法应用较广,但仍存在着纯化困难的问题。迄今为止,还没有针对鼠尾胶原蛋白进行大规模制备的相关研究的报道。

本研究的目的就是为了克服现有制备鼠尾胶原蛋白方法所存在的提取得率低、分离纯化工艺复杂、没有大规模生产方法等缺点,提供一种工艺简单、提取得率和纯度高的鼠尾胶原蛋白的制备方法。为大量获得鼠尾胶原蛋白并进行更深层次的功效研究提供理论支持和实践基础。

1 材料和方法

1.1 实验动物

SD大鼠鼠尾,由广东省医学实验动物中心提供[生产许可证号SCXK(粤)2008-0002;使用许可证号SYXK(粤)2008-0002]。

1.2 仪器与试剂

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