卢 斌，顾 萍，邵加庆，杜 宏，王 坚

（南京军区南京总医院内分泌科，南京 210002）

骨骼肌胰岛素抵抗是肥胖和2型糖尿病发生的 重要机制。研究发现蛋白酪氨酸磷酸酶1B（protein tyrosine phosphatase 1B，PTP1B）负性调节胰岛素信号转导，其表达增加及活性增强可以导致胰岛素抵抗的发生。吡格列酮作为胰岛素增敏剂改善胰岛素抵抗，但其作用机制尚未明确。本研究通过吡格列酮干预来观察其对db/db小鼠骨骼肌PTP1B表达的影响，探讨吡格列酮改善胰岛素敏感性的可能作用机制。

1 材料和方法

1.1 实验动物与分组：

C57BL/KsJ db/db小鼠购自美国 Jackson实验动物中心，并在本院实验动物中心繁育成功（SCXK［军］20072012）。实验期间小鼠在层流柜中饲养，所有器具及食物均消毒，无菌操作。小鼠自由进食、进水，保持垫料干燥，温度保持在23℃，12 h/12 h亮暗周期。按随机数字表将小鼠分为吡格列酮组10只和db/db对照组10只，每日固定时间分别给予吡格列酮（艾汀，北京太洋药业有限公司生产）10 mg/kg体重和相同体积的安慰剂（5％阿拉伯胶）灌胃，连续给药4周，另选取10只同周龄同窝出生的C57BL/KsJ db/m小鼠给予安慰剂灌胃作为非糖尿病对照组（db/m组）。实验结束，所有动物麻醉处死取骨骼肌，冻存于-70℃。

1.2 观察指标

1.2.1 生理生化指标 每周监测小鼠体重和空腹血糖，投药前和投药4周后测定空腹血糖（FBG）、空腹胰岛素（FINS）。血糖测定使用强生公司生产的One-Touch血糖仪。血清胰岛素水平的测定采用小鼠胰岛素 ELISA试剂盒（Morinaga，Yokohama， Japan）。胰岛素敏感性用 HOMA胰岛素抵抗指数（HOMA-IR，HOMA-IR=FPG×FINS/22.5）来评价。1.2.2 PTP1B蛋白表达的测定 提取骨骼肌蛋白，采用BCA蛋白定量试剂盒检……