赵科研，王辉山，侯明晓，孙江滨，吴慧颖，柳克祥

（1.中国人民解放军沈阳军区总医院心血管外科，沈阳 110016； 2.吉林大学第二医院心血管外科，长春 130041）

肺动脉高压（pulmonary artery hypertension，PAH）是顽固性和致死性疾病，肺血管阻力进行性增高，最终导致右心衰竭而死亡，是严重的内皮功能障碍的血管疾病。人们尝试再生手段打断 PAH的恶性循环，移植骨髓细胞，如内皮祖细胞、内皮样祖细胞和基质干细胞，以再生健康的内皮细胞，显示了初步的疗效［1-3］。野百合碱是豆科植物野百合中提取的生物碱，具有细胞毒性作用，代谢产物通过肺脏时沉积于肺小动脉壁及肺毛细血管，导致对肺血管的损伤，破坏肺组织内皮细胞等，导致肺动脉高压，常做为制作肺动脉高压模型的药物［4］。对于不同MSCs数量移植的安全性，以及移植对MCT诱导肺血管损伤的抑制效应如何尚不明确，本文对此研究。

1 材料和方法

1.1 实验动物

清洁级雄性W istar大鼠（3周，60～70 g），成年雄性W istar大鼠60只，体重（180～250）g，均由吉林大学实验动物中心提供（SCXK［吉］2008-0005）。

1.2 主要仪器和试剂

全自动显微镜数码摄像系统（OLYMPUS，日本），LEICA病理切片机（德国），多功能病理图象分析仪（同济），BL-420E+生物机能实验系统（成都泰盟科技有限公司），流式细胞仪（Becton Dickinson美国）。低糖DMEM培养基（Gibco公司），特级胎牛血清（Gibco公司），胰酶（Sigma公司），亚美尼亚仓鼠抗大鼠CD29-Alexa Fluor（Biolegend公司），小鼠抗大鼠CD45-FITC（Biolegend公司），小鼠抗大鼠CD44-PE（Santa Cruz公司），小鼠抗大鼠CD34 -FITC（Santa Cruz公司），平滑肌 Actin免疫组化试剂盒（武汉博士德）。

1.3 方法

1.3.1 MSCs的分离、培养和鉴定

W istar大鼠幼鼠断颈处死，酒精浸泡15 m in，无菌条件下分离股骨、胫骨，DMEM培养液冲洗骨髓腔。……