梁睿姝，张 川，邹 豪，金 磊(.广东双林生物制药有限公司，广东湛江54009;.第二军医大学药学院新药研究中心，上海00433)

山楂为蔷薇科植物(Rosaceae)山里红Crataegus pinnatifida Bge.var.major N.E.Br，山楂 Crataegus pinnatifida Bge.及野山楂Crataegus cuneata Sieb et Zucc.的干燥成熟果实，又称山楂果、山里红、山梨、红果等［1，2］。山楂的化学成分主要为有机酸类、酚酸类、三萜酸类、黄酮类［3］。绿原酸作为其中的主要成分之一，是卫生部质量标准鉴别项下重要的质控指标。

目前，绿原酸的含量测定方法主要有紫外可见分光光度法［4］、薄层色谱扫描法［5］、高效毛细管电泳法［6］、高效液相色谱法等［7］。在这些方法中，高效液相色谱法(HPLC)具有高效、准确，受其他成分影响小的优点。用高效液相色谱法对山楂活性成分分析的报道较多，但很多报道都是测定黄酮类成分，对山楂中绿原酸的分析报道较少［8，9］。本研究完成了通过方法学研究，建立绿原酸含量测定方法，证明该法具有准确、重现性好、专属性强、快捷简便等特点，可用于控制本品的内在质量。

1 材料与仪器

1.1 材料 山楂(产自山东);甲醇(分析纯，国药集团试剂公司);磷酸(分析纯，国药集团试剂公司);甲醇(色谱纯，美国J.T.Baker公司);水(娃哈哈纯净水);绿原酸(中国药品生物制品检定所，批号:117053-200413)。

1.2 仪器 DK-8D型电热恒温水槽(上海森信实验仪器有限公司);超越系列 XP205电子天平(METTLER TOLEDO);旋转蒸发仪R-210(瑞士BUCHI公司);e2695高效液相色谱仪(美国Waters公司);2489紫外分光光度计(美国Waters公司)。

2 方法与结果

2.1 色谱条件 色谱柱:Diamonsil C18柱(250 mm ×4.6 mm，5 μm);流动相:甲醇-0.1 mol/L磷酸二氢钠缓冲液(25∶75);流速为1.0 ml/min;柱温:28℃;检测波长:327 nm;进样量:10 μl。

2.2 溶液的制备

2.2.1 对照品溶液的制备 精密称取绿原酸对照品7.03 mg，置100 ml量瓶中，用甲醇定容，摇匀得浓度70.3 μg/ml母液，置－20℃冰箱保存。……