116例急性髓系白血病免疫表型特点分析
2012-01-29夏永泉
王 贤,夏永泉,张 燕,张 葵
(南京大学附属鼓楼医院,南京210008)
急性髓系白血病(AML)是血液系统恶性疾病,传统FAB形态分类的诊断符合率仅有70%左右,已经远远不能满足临床需要,随着检验技术的进步,尤其是流式细胞术(FCM)的临床广泛应用,免疫学分型在白血病分型诊断中的地位越来越重要,它可以全面、特异、准确地检测出白血病细胞抗原分布情况,使白血病分型结果更准确、客观,有助于白血病的诊断、治疗、预后分析。我们对156例AML患者进行了白血病免疫分型检测,对其抗原表达与疾病临床特点及临床意义进行了分析,并探讨不伴淋系相关抗原的AML、伴淋系抗原表达的AML的免疫分型特点及其临床意义。
1 资料与方法
1.1 临床资料 随机选取本院2008年6月~2011年12月,我科初治AML患者116例,其中男65例、女51例,年龄15~75岁。均经骨髓形态学、细胞组织化学染色、免疫分型而确诊。按FAB标准分类: M0 4例、M1 17例、M2 30例、M3 30例、M4 16例、M5 19例。
1.2 仪器与试剂 FACS Calibur流式细胞仪为BD公司产品,单克隆抗体:CD13、CD33、HLA-DR、CD34、CD117、CD34、CD38、CD19、CD5、CD10、CD7、CD56、CD14、CD20、CD11b、CD15,MPO、CD79a、CD3、CD45等,破膜剂TZX&PERM及溶血素,均购自BD公司,鞘液为自配的PBS缓冲液。
1.3 试验方法 116例AML患者于入院治疗前抽取EDTA-K抗凝骨髓送检。调整骨髓标本为浓度为109/L,加入荧光标记抗体,常温避光孵育15 min后加入溶血素500 μL,常温避光孵育15 min,离心,PBS洗涤,250 μL PBS重悬,上流式细胞仪检测。每管获取分析10 000个细胞,根据细胞抗原表达情况及细胞大小、胞内颗粒多少等信息找出白血病幼稚细胞群进行分析。表面抗原>20%判断为阳性,胞内抗原>10%判断为阳性。
1.4 统计学方法 全部数据采用SPSS13.0统计软件进行分析处理,组间比较采用方差检验,两两比较采用四格表检验。……
