基质辅助激光解析电离飞行时间质谱技术在病原真菌检验中的应用进展
2012-01-27张超廖万清
张超 廖万清
(上海长征医院皮肤病与真菌病研究所 全军真菌病重点实验室 第二军医大学长征医院皮肤科,上海 200003)
随着广谱抗生素、免疫抑制剂在临床的广泛使用,导管插管、腹膜透析、放射治疗等大量开展,尤其是人类免疫缺陷病毒 (HIV)感染者的不断增多,真菌病已成为影响人类生活质量、威胁生命健康的重要疾病之一。镜检和培养是临床实验室最常规的真菌检测方法,然而,镜检的阳性率较低,培养会受到时间及实验室人员技术水平的限制。分子生物学技术鉴定临床分离真菌方法多样,包括DNA中G+C mol%含量测定、核酸杂交技术、限制性酶切片段长度多态性分析、电泳核型分析、随机扩增多态性DNA分析、rDNA ITS序列分析等,不同方法之间各有优势和不足,仍在不断完善中[1]。
基质辅助激光解析电离飞行时间质谱技术(Matrix-Assisted Laser Desorption/Ionization Time of Flight Mass Spectrometry,MALDI-TOF MS)是一种可用于检测大分子物质的“软电离”质谱分析技术。近年来,该技术在致病性微生物尤其是细菌的研究中被证实是一种准确、快速、经济的检验方法[2-4]。随着 MALDI-TOF MS技术的不断完善和发展,
其在致病性真菌研究中的作用也日显突出,现就该技术在病原真菌研究中的应用进展作一综述。
1 MALDI-TOF MS应用于微生物检验的基本原理
20世纪80年代后期,基质辅助激光解析电离(Matrix-Assisted Laser Desorption/Ionization,MALDI)和电喷雾电离 (Electrospray ionization,ESI)两种“软电离”技术在质谱领域的应用,开创了质谱技术研究生物大分子的局面[5-7]。MALDI-TOF MS的基本原理[8]:当用一定波长的激光照射由基质和样品形成的共结晶薄膜时,基质吸收……
