梁 兵,袁 芳,杨 宁,殷建瑞,蒲蜀湘,解龙昌,高庆春,高 聪△

(1.广州医学院第二附属医院神经科学研究所/神经内科,广州 510260;

2.广州医学院第五附属医院神经内科,广州 510700)

3种不同类型基因导入系统转染类神经元细胞的效率比较*

梁 兵1,袁 芳1,杨 宁2,殷建瑞1,蒲蜀湘1,解龙昌1,高庆春1,高 聪1△

(1.广州医学院第二附属医院神经科学研究所/神经内科,广州 510260;

2.广州医学院第五附属医院神经内科,广州 510700)

目的应用3种不同类型基因导入系统携带能表达绿色荧光蛋白的pAAV-EGFP质粒转染两类神经元细胞株,并对细胞毒性和转染效果进行比较｡方法 LipofectAMINE 2000､聚乙烯亚胺(polyethylenimine,PEI,相对分子质量为25×103)及该课题组合成的PEI-聚乙二醇(polyethyleneglycol,PEG)4.6在SH-SY5Y神经母细胞瘤细胞和C6胶质瘤细胞中的转染效果,通过MTT法检测细胞存活率,倒置显微镜荧光观察法和流式细胞仪法检测转染效果｡结果MTT检测发现,在C6胶质瘤细胞中,PEG-PEI 4.6的细胞存活率为83%,比PEI(70%)和 LipofectAMINE 2000(73%)的细胞存活率要高(P0.05);但 LipofectAMINE 2000和PEI的细胞存活率比较,差异无统计学意义(P0.05);在SH-SY5Y神经母细胞瘤细胞中的检测结果与C6胶质瘤细胞类似｡倒置显微镜观察发现,在C6胶质瘤细胞中,PEG-PEI 4.6的细胞荧光表达效果比LipofectAMINE2000和PEI要好;而在SH-SY5Y神经母细胞瘤细胞中,LipofectAMINE 2000的荧光表达效果比另外两种复合物的效果好,同时PEG-PEI 4.6的荧光表达效果比PEI要好｡流式细胞仪检测发现在C6胶质瘤细胞中,PEG-PEI 4.6的转染效率最好,为23.2%;LipofectAMINE2000其次,为16.9%;PEI最差,为12.6%,三者两两比较差异有统计学意义(P0.05)｡在SH-SY5Y神经母细胞瘤细胞中则是LipofectAMINE 2000的转染效率最好,PEG-PEI 4.6其次,PEI最差,转染效率分别为22.3%､17.2%､10.6%,三者两两……