HPLC法同时检测血浆中半胱氨酸/胱氨酸和还原型谷胱甘肽/氧化型谷胱甘肽的氧化还原电势
2012-01-25杨荟敏祝佳玮赵宸龙张晨光赵文明
杨荟敏 祝佳玮 赵宸龙 张晨光 张 红 赵文明
(1.首都医科大学基础医院细胞生物学系,肝脏保护与再生调节北京市重点实验室,北京100069;2.首都医科大学基础医院免疫学系,北京100069;3.首都医科大学基础医学院,北京100069)
含有巯基/二硫键的化合物在体内发挥着多种不同的作用,可参与调控细胞信号传导,蛋白质以及其他分子化合物等的组成、转运和功能等。体内含有巯基/二硫键的化合物有半胱氨酸/胱氨酸(cysteine/ cystine,Cys/CySS),谷胱甘肽氧化态/还原态(reduced glutathione/oxidized glutathione,GSH/GSSG)以及硫氧还原蛋白1和2(thioredoxin1/2,Trx1/2)[1]等,这些物质在体内环境中以氧化态和还原态的形式存在,处于动态变化的过程中并最终达到一个相对氧化还原平衡的状态。一旦这种平衡状态被破坏,机体即启动与超氧自由基产物的相关机制,从而影响脂蛋白修饰、转换和细胞功能及代谢素产生损伤[2-4],而且可对葡萄糖和糖蛋白的自身氧化作用和抗氧化酶的糖化作用产生影响。
氧化应激参与体内多种生理活动及疾病的发生[5],因此,寻找能够探测体内氧化还原状态生物学指标的简单且准确的方法,对研究氧化应激参与的体内生理活动极为重要。目前,检测体内某种蛋白氧化还原状态的方法很多。应用比较广泛的主要有氧化还原蛋白免疫印记法[5];生物素标记的碘乙酰胺蛋白免疫印记法[6-7];此外还有一些相关的测定方法如:酶循环法[8]、磁共振光谱检测法[9]以及电化学测定法[10]等。但这些方法在某些方面如检测灵敏度,相对精确定量蛋白的氧化还原状态等受到实验条件的限制,具有一定的局限性。……
