陈超群，吴移谋，任 林，刘良专

肺炎嗜衣原体Cpn0797蛋白的生物信息学分析及其单克隆抗体制备鉴定＊

陈超群1，吴移谋1，任 林2，刘良专1

目的生物信息学分析肺炎嗜衣原体Cpn0797蛋白的结构，制备特异性的抗Cpn0797蛋白的单克隆抗体。方法用ProtParam、SignalP、NPS＠ 、和PSORT等软件对Cpn0797蛋白的理化参数、信号肽、二级结构、蛋白亚细胞定位进行分析；原核表达纯化GST－Cpn0797融合蛋白，以其为免疫原免疫BALB／c小鼠，杂交瘤技术制备单克隆抗体，采用间接免疫荧光法鉴定单克隆抗体的亚类和特异性。结果生物信息学分析表明Cpn0797蛋白二级结构以无规则卷曲为主；成功地建立了能稳定分泌抗Cpn0797蛋白的单克隆抗体杂交瘤细胞株，单克隆抗体能特异性的识别Cpn0797内源性蛋白。结论成功制备特异性的Cpn0797单克隆抗体，为进一步探究Cpn0797蛋白的生物学功能提供实验基础。

肺炎嗜衣原体；Cpn0797；生物信息学；单克隆抗体

肺炎嗜衣原体（Chlamy dophila pneumoniae，Cpn）是一种严格细胞内寄生、具有独特发育周期的病原微生物，其感染不仅可引起肺炎、支气管炎和咽炎等呼吸道疾病［1］，而且还与动脉粥样硬化等心血管疾病密切相关［2－4］。病原菌和宿主相互作用过程中，衣原体可通过Ⅲ型分泌系统（T3SS）或其他分泌机制将本身的蛋白质穿过真核细胞膜或包涵体膜而进入宿主细胞质［5－8］或定位于包涵体膜上［9］，进而影响宿主细胞正常的新陈代谢和功能；衣原体蛋白酶（体）样活性因子（chlamydial protease／proteasomelike activity factor，CPAF）［10－11］是首个被发现的衣原体分泌蛋白，被分泌至宿主细胞质内发挥着蛋白酶活性，降解宿主细胞的转录因子RFX5和上游刺激因子1（USF－1）而下调宿主细胞 MHC I、II类分子的表达水平，使衣原体逃避宿主的免疫识别；……