吴科荣，许 乐，张 立，侯 君，林宗明，蒋照辉

1.浙江省宁波市第一医院泌尿肾病中心（宁波315000）

2.复旦大学附属中山医院（上海200032）

我们曾经报道了Notch 通路中重要配体蛋白Jagged1的表达与肾癌的分级、分期、肿瘤大小有关，Jagged1 的表达水平可以作为早期肾癌的独立预后因子[1]。本研究综合利用免疫组化和Western blot的方法，选择2003年3月—2008年11月在复旦大学附属中山医院行肾癌手术，术后病理证实为肾透明细胞癌的病例共计129 例，以更大样本量进一步检测Notch1 与Jagged1 在肾癌组织及正常肾组织中的表达,并探讨蛋白表达与临床病理特征的关系，以及Notch1与Jagged1作为肾癌预后判断指标的价值。

1 对象与方法

1.1 一般资料 本组129例中，男84例，女45例；年龄27～83 岁，平均55.5 岁。采用肾根治术122 例(94.6%)，肾部分切除术7 例(5.4%)。肿瘤按TNM(2002 AJCC)分期：Ⅰ期81 例, Ⅱ期17 例，Ⅲ期24例, Ⅳ期7例。肿瘤按Fuhrman分级：1级53例，2级54 例，3 级18 例，4 级4 例。肿瘤大小1.5～15 cm，平均5.3 cm。平均随访时间47.2个月。37例术后出现复发(28.7%)，92例未发现肿瘤术后复发(71.3%)。86例无瘤生存，6 例带瘤生存。死亡37 例，其中31 例死于肿瘤，6例死于其他疾病。

1.2 研究对象 本项研究经由复旦大学伦理委员会批准（NO.2008-98）。129例均取术后肾癌组织切片标本，用于免疫组化染色，其中33例同时在距离癌组织边缘5.0 cm 以外的正常组织处取材作为对照。组织标本均采用10%甲醛固定，石蜡包埋，5 μm连续切片。其中8例在术中即刻采集新鲜肾癌标本及远离肿瘤的正常肾组织，用作Western blot检测。组织在经病理检查，迅速导入液氮肿瘤库保存。

1.3 Western blot 肾癌肿瘤组织及相应正常组织共8 例，每20 mg 组织加入0.25 mL RIPARIPA 缓冲液，加入蛋白酶抑制剂混合物，组织匀浆使细胞充分裂解，离心获取总蛋白。……