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高效液相色谱法测定复方蛇补酊剂中蛇床子素的含量*

2012-01-12高培平苑振亭

高培平 苑振亭

(1.泰山医学院附属泰山医院,山东 泰安 271000; 2.中国人民解放军第230医院,辽宁 丹东 118000)

蛇床子系伞形科蛇床属植物蛇床[cnidium monnieri (L.) cuss]的果实[1],为常用中草药,蛇床子素(osthol)是从中药蛇床子中提取的主要有效成分之一[2]。蛇床子及其制剂在临床已应用多年,主要用于止痒[3-6]、治疗湿疹[7-9]等 。因此我们研制了复方蛇补酊剂用于治疗湿疹,采用HPLC法测定复方蛇补酊剂中蛇床子素的含量,现介绍如下。

1 仪器与试剂

高效液相色谱仪(HTTACHI L-7110);超声清洗器(昆山市超声仪器有限公司);电子分析天平; T2000P色谱工作站; 蛇床子素对照品(中国药品生物制品检定所,批号:110822-200305);其余试剂均为色谱纯、分析纯。

2 方 法

2.1色谱条件 色谱柱:Hypelsil C18柱(250 mm×4.6 mm,5 μm);流动相:甲醇-水(80︰20);检测波长:320 nm;流速:1.0 ml·min-1;进样量:20 μl;理论塔板数按蛇床子素计算应不低于1000。在上述色谱条件下,蛇床子素与杂质峰分离良好。色谱图见图1。

2.2对照品溶液 精密称取蛇床子素对照品适量(相当于蛇床子素20 mg),加流动相制成0.1 mg·ml-1的溶液备用。

2.3标准曲线的制备 精密量取对照品溶液用流动相稀释制成每1 ml中含1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 μg的标准品溶液,取20 μl进样测定。

图1 高效液相色谱图

A.蛇床子素对照品;B.供试品;C.空白对照(不含蛇床子)

3 结 果

3.1标准曲线的线性、最低检测量(LLOD)和最低定量限(LLOQ) 以浓度C对蛇床子素的峰面积A进行线性回归,得回归方程为A = 706242C+7632.3(r=0.9997)。结果表明,蛇床子素在1.0~5.0 μg·ml-1范围内,线性关系良好。最低检测量(LLOD)和最低定量限(LLOQ)分别是0.2 μg·ml-1和1 μg·ml-1。

3.2回收率与精密度试验 精密量取对照品溶液适量,分别制成浓度为1.0,3.0,5.0 μg·ml-1的样品溶液,取20 μl进样测定,结果见表1。……

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