刘 琳，谢志明

(辽宁医学院 附属第三医院 肾内科，辽宁 锦州 121000)

血管生成素(Angiopoietins，Ang)是一组内皮细胞特异性分泌型生长因子，1985年，Ang首次从人结肠癌细胞培养上清中被发现［1］，Ang的四种同分异构体之一的Ang-1与血管的形成密切相关［2］，且具有抑制内皮凋亡、促进内皮细胞出芽、稳定血管及降低血管通透性的作用［3］。近年来，其在小鼠肾脏胚胎血管发育以及人的肾脏功能调控方面的作用日益受到关注，但对小鼠肾脏发育中表达变化规律的研究目前国内报道较少。

本文观察了Ang-1在小鼠肾脏发育中的形态学变化，并应用免疫组织化学技术及免疫印迹技术(Western blotting)对其进行了定性及定量观察，以探讨在小鼠肾脏发育中Ang-1的作用。

1 材料

Ang-1兔抗小鼠多克隆抗体、SABC试剂盒，武汉博士得生物制品公司。

Zeiss-A1显微镜和照相机(德国);MIVNT显微图像分析系统(中国)。

昆明系小鼠，辽宁医学院实验动物中心提供，许可证号:SCXK(辽)2003-2007。

2 方法

2.1 实验动物培养及取材

昆明系小鼠，以观察到阴道栓脱落的最早时间计为胚龄0 d。记录受孕时间。随后每日早8点和晚5点观察仔鼠出生情况，记录出生时间。取胚龄14，16，18 d 胎鼠和出生后 1，7，14，21 和 42 d 仔鼠，每组4只，每只母鼠取2只胎鼠或仔鼠。分别取胎鼠及仔鼠的左右肾脏。左肾放入10%中性福尔马林溶液固定，右肾入液氮迅速冷冻，-80℃冰箱保存，留做Western blotting试验。

2.2 光镜标本制备

左肾经固定、冲洗、脱水，石蜡定向包埋，切片厚5 μm，部分切片HE染色，部分切片用于免疫组化染色，光镜下观察。

2.3 免疫组化检测Ang-1的表达

切片常……