王晓玉，刘 飞，颜 震，张 莉，朱希强，郭学平，凌沛学

(1.山东大学药学院，山东 济南 250012;2.山东省药学科学院生物技术中心，山东 济南 250101)

浸麻芽孢杆菌环糊精葡糖基转移酶的克隆与表达

王晓玉1，2，刘 飞2，颜 震2，张 莉2，朱希强2，郭学平2，凌沛学1，2

(1.山东大学药学院，山东 济南 250012;2.山东省药学科学院生物技术中心，山东 济南 250101)

目的 获取浸麻芽孢杆菌环糊精葡糖基转移酶基因并在大肠杆菌中表达。方法 构建浸麻芽孢杆菌环糊精葡糖基转移酶表达质粒，转化大肠杆菌DH5α，筛选获得阳性重组菌株。经42℃诱导后，检测酶活性。结果浸麻芽孢杆菌环糊精葡糖基转移酶在大肠杆菌中成功表达，表达量达3 U/mL。结论 浸麻芽孢杆菌环糊精葡糖基转移酶可以在大肠杆菌中高效表达。

环糊精葡糖基转移酶;浸麻芽孢杆菌;表达;大肠杆菌

环糊精葡糖基转移酶(CGTase，EC 2.4.1.19)是α-淀粉酶家族的重要成员，能将淀粉通过环化反应转化为环糊精［1］，且还可通过逆反应将环糊精与维生素C结合生成维生素C葡糖苷［2］。环糊精在食品、医药、农业、纺织、环保和分析化学等领域具有广泛的应用［3］，维生素C葡糖苷也是化妆品生产领域重要的原料之一［4］。环糊精和维生素C葡糖苷的工业化生产均采用酶法合成，但由于野生菌株的产酶能力普遍较低，CGTase的产量远不能满足工业化生产的要求，其应用受到了很大限制，必须提高CGTase产量和活性。因此，基因工程方法生产CGTase越来越得到重视。目前已有利用大肠杆菌(E.coli)表达CGTase的报道，但多为包涵体，活性不高。……