于瑞莲，许金国，顾晓娟

(南京中医药大学 药学院，江苏 南京 210029)

白花蛇舌草(Hedyotis diffusa Wild.)是一年生披散草本，属茜草科(Rubiaceae)耳草植物的全草，广泛分布于亚热带地区，在我国主要分布于长江流域以南的广东、广西、福建等地。主要用于清热解毒、利尿消肿、止痛抗菌、活血止痛。民间常用此药内服，治疗小儿疳疾、毒蛇咬伤、癌肿及肠道疾病。外用治各种疮疡及跌打刀伤等症;为治疗肠痈、肝炎、泌尿系统感染等病的有效中药。

白花蛇舌草化学成分研究发现了多糖［1］、黄酮甙车叶草甙和3个环烯萜类化合物、熊果酸、齐墩果酸等多种化合物［2］。药理研究表明其具有增强动物免疫功能，保肝利胆，抗菌消炎等作用。近年来通过大量临床实践，发现本品有很好的抗肿瘤作用，临床广泛用于治疗多种恶性肿瘤［3-4］。

本实验利用从白花蛇舌草种子培育的试管苗的茎尖，建立了愈伤组织及悬浮细胞系，系统研究了其悬浮细胞系的建立与生长规律，从而为大规模培养提供了大量的理论与实验基础。

1 材料和方法

1.1 植物材料

白花蛇舌草种子由本校药用植物教研室提供;白花蛇舌草愈伤组织由本实验室诱导选育。

1.2 细胞悬浮系的建立

愈伤组织的诱导与继代培养［5］:取白花蛇舌草试管苗的茎尖接种于MS+2，4-D(2，4-二氯苯氧乙酸)4.0mg/L+Kt(激动素)0.5mg/L［5］+3% 蔗糖的培养基，将茎尖的愈伤组织转接，进行继代培养2～3次，每20 d继代1次，采用100mL锥形瓶，装液量50mL，0.8% 琼脂粉固化，光照强度2 000 lx，光照时间12 h/d，温度保持(26±1)℃。

悬浮细胞系的建立与培养［6］:将继……