柴玉荣,刘国红,崔柳青,刘红涛,李 杰,薛乐勋#

1)郑州大学基础医学院组织学与胚胎学教研室郑州 450001 2)郑州大学生物工程系细胞生物学研究室郑州 450001 #通讯作者,男,1944年 2月生,研究员,研究方向:肿瘤与生物工程,E-mail:xuelx@371.net

杜氏盐藻高盐诱导蛋白的分离和鉴定＊

柴玉荣1),刘国红1),崔柳青2),刘红涛2),李 杰2),薛乐勋2)#

1)郑州大学基础医学院组织学与胚胎学教研室郑州 450001 2)郑州大学生物工程系细胞生物学研究室郑州 450001 #通讯作者,男,1944年 2月生,研究员,研究方向:肿瘤与生物工程,E-mail:xuelx@371.net

杜氏盐藻;双向电泳;质谱;高盐

目的:对高盐和低盐培养条件下杜氏盐藻蛋白质组的双向电泳 (2-DE)图谱进行比较分析,筛选高盐诱导蛋白并鉴定。方法:提取高盐 (3.5 mol/L NaCl)和低盐 (1.5 mol/L NaCl)培养条件下杜氏盐藻的总蛋白并进行2-DE,考马斯亮蓝染色后用 I mage-Scanner扫描仪扫描,I mageMaster 5.0图像分析软件分析,并利用基质辅助激光解析电离质谱法 (MALD I-TOF)对在高盐培养条件下增强表达达到 3倍的蛋白进行鉴定。结果:2-DE图谱上共分离出 509个杜氏盐藻蛋白质斑点,主要分布在等电点 4～8和相对分子质量 20 000～97 000的范围内;高盐培养条件下有 21个蛋白增强表达达到 3倍并且通过MALD I-TOF鉴定出了其中的 12个。结论:成功获得了分辨率和重复性较好的杜氏盐藻蛋白质组 2-DE图谱,鉴定得到了 12种高盐诱导增强表达达到 3倍的蛋白。

近年来,人们对生物耐盐机制有了深入的认识,但植物的整个耐盐体系及耐盐机制仍不清楚[1-2]。杜氏盐藻 (Dunaliella salina,D.salina)是一种没有细胞壁的单细胞真核绿藻,其突出优点在于光合自养、培养条件简单且抗逆性极佳,能在NaCl浓度很高甚至饱和的环境中生长繁殖[3]。……