移植途径对大鼠骨髓间充质干细胞归巢及肝功能恢复的影响
2011-12-06何秀华李东良江军徐颖范敬静陈娟陈胜平
何秀华 李东良 江军 徐颖 范敬静 陈娟 陈胜平
活体肝移植是近年来发展起来的一种治疗终末期肝病的新技术,为解决供肝来源的短缺开拓了新的途径。活体肝移植的关键性技术之一是使移植到受体的肝组织块以及供体剩余的肝组织能尽快再生,以满足机体代谢所需有效的肝体积。因此,促进部分肝移植肝再生的研究也就成了近年来器官移植领域一个新的研究热点。骨髓间充质干细胞( mesenchymal stem cells,MSCs ),是中胚层分化而成的一种非造血成体干细胞,近年来发现其不仅具有强大的潜在自我更新能力,并且在特定条件下可以分化成脂肪细胞、成骨细胞和肝细胞等多种细胞,动物实验亦表明 MSCs 可以修复损伤或基因突变的骨、软骨和心肌等组织[1]。但 MSCs 促进肝再生的确切作用尚不十分明确。本研究建立肝大部切除大鼠模型,将体外培养的骨髓 MSCs 分别通过尾静脉及门静脉两种途径移植到肝脏,观察其在肝脏的归巢、定植及对肝再生的作用,为骨髓干细胞( bone marrow stem cell,BMSCs )治疗肝病提供理论依据。
材料和方法
一、材料
清洁级 SD 大鼠共 36只,其中 10周龄(体重 180~220 g)31只,4周龄(体重 60~80 g)5只,均购自上海斯莱克实验动物有限责任公司,许可证号SCXK(沪)2007-0005,饲养于南京军区福州总医院比较医学中心 IVC 清洁级实验动物饲养系统;DMEM/F12培养基及胰酶均购自美国 Gibico公司;胎牛血清购自奥地利 PAA 公司;仓鼠抗大鼠CD29-PE、小鼠抗大鼠CD45-PE、小鼠抗大鼠CD90.1-PE 均购自美国 BioLegend 公司;小鼠抗大鼠CD34-PE购自美国 Santa Cruz 公司;4',6-二脒基-2-苯基吲哚( 4',6-diamidino-2-phenylindole,DAPI )购自美国 Roche 公司。……
