张学亚，潘敬新，郭熙哲，战 榕

2-甲氧基雌二醇(2-methoxyestradiol，2-ME2)是17β-雌二醇在体内的生理代谢产物，由雌二醇2位碳原子先羟基化再甲基化而来，化学名为17β-2-甲氧基雌-1，3，5(10)-三烯-3，17-二醇［1］。具有选择性杀伤肿瘤细胞［2］，而对正常细胞毒性小［3］以及对雌激素受体α和β无依赖性［4］等特点，受到人们的广泛关注。有研究表明［2］2-ME2在体外能够抑制多种不同组织来源的肿瘤细胞增殖，体内动物模型试验亦表明2-ME2具有明显的抑制肿瘤增殖及减少肿瘤负荷的作用。但其确切作用机制尚不明确。本文选择人急性T淋巴细胞白血病细胞株CEM作为2-ME2体外研究模型，探讨其对CEM细胞的抗肿瘤作用及其可能机制。

1 材料与方法

1.1 材料 主要试剂:人急性T淋巴细胞白血病细胞株CEM细胞(福建省血液病研究所细胞库);2-ME2购自Sigma公司，用二甲基亚砜(DMSO，Sigma公司)溶解配成2 mmol·L-1原液，4℃保存备用，实验前用细胞培养液稀释，DMSO终浓度＜0.1%。标准胎牛血清为杭州四季青公司产品，RPMI 1640为Gibco公司产品，Akt、p-Akt(ser473)兔多抗购自Cell Signaling Technology公司，β-actin鼠单抗为武汉博士德公司产品，蛋白酶抑制剂为上海康成生物工程有限公司产品，化学发光底物试剂和辣根过氧化物酶(HRP)标记的羊抗鼠、羊抗兔抗体均购自Pierce公司。

1.2 方法

1.2.1 人急性淋巴细胞白血病CEM细胞株的培养常规复苏人急性淋巴细胞白血病CEM细胞，用含10%胎牛血清的RPMI 1640培养液，于37℃、5%CO2饱和湿度条件下进行培养，2～3 d换液传代1次。所有实验均采用对数生长期细胞。

1.2.2 MTT法检测2-ME2对CEM细胞增殖活性的影响 将CEM细胞(1×108·L-1)接种于96孔培养板中，经不同浓度的2-ME2作用48 h，实验结束前……